Tofauti kuu kati ya GFP na EGFP ni kwamba GFP ni protini ya aina ya mwitu iliyojumuishwa katika uunganishaji wa molekuli ya seli zisizo za mamalia huku EGFP ni aina iliyoboreshwa au iliyoundwa ya GFP ambayo inaweza kutumika kwenye seli za mamalia..
Kuunganisha kwa molekuli ni mbinu ya hali ya juu ambayo wanasayansi hutumia kwa wingi katika kueleza protini kupitia teknolojia ya upatanishi. Katika teknolojia ya recombinant DNA, ni muhimu kubadilisha vekta recombinant kwa mafanikio ili viumbe mwenyeji. Kwa hivyo, wakati wa mchakato wa mabadiliko, inapaswa kutambuliwa na kuthibitishwa ikiwa jeni la riba limebadilishwa au la kwa seva pangishi. Ili kutathmini hili, wanabiolojia wa molekuli hupitisha mbinu kadhaa. Kati ya mbinu hizo, moja ni jeni la mwandishi. Jeni hizi za ripota hufanya kama vialamisho vinavyoweza kuchaguliwa ili kuchagua vibadilishaji vibadilishaji vilivyo sahihi. Kwa hivyo, Protini ya Fluorescent ya Kijani (GFP) na Protini ya Kijani iliyoboreshwa ya Fluorescent (EGFP) ni protini mbili za ripota zinazotumika katika uunganishaji wa molekuli.
GFP ni nini?
GFP ni protini ya aina ya mwitu ambayo ina mabaki 238 ya asidi ya amino na maeneo kadhaa yanayoweza kuchaguliwa ya mfuatano wa asidi ya amino ambayo huitofautisha na protini nyingine za fluorescent. Zaidi ya hayo, protini hii ya aina ya mwitu awali ilikuwa imetengwa na Aequorea Victoria; aina ya jellyfish. Hata hivyo, katika hali ya asili, jellyfish aliweza kutoa mwanga wa rangi ya kijani kibichi kutokana na vichocheo fulani.
Hapo awali, dhana hii iliwashangaza wanasayansi, na wakaamua kuitumia kwenye teknolojia zao za DNA. Kwa hivyo, wanasayansi walitumia aina hii ya kubadilika ya jeni la aina ya mwitu kama jeni la mwandishi katika masomo yao ya usemi wa jeni. Jeni la aina ya pori la GFP lina uwezo wa kutoa protini inayotoa mwanga wa mwanga wa ultraviolet kwenye joto la kawaida au chini ya mwanga wa UV. Kwa hiyo, wakati wa kuingizwa ndani ya transfoma, inaelezea na hutoa fluorescence. Ikiwa matokeo ya fluorescence baada ya mchakato wa mabadiliko, inathibitisha mafanikio ya mchakato wa mabadiliko. Kwa maneno rahisi, utoaji wa fluorescence huashiria mabadiliko ya mafanikio ya vekta ambayo hubeba jeni la kuvutia kwenye seva pangishi.
Kielelezo 01: GFP
Kwa sababu hii, GFP hufanya kazi kama kiashirio katika vivo ya usemi wa jeni. Kwa sasa, mbinu za uhandisi jeni zinatumika kuzalisha GFP. Pia, matoleo mengi yaliyoboreshwa ya GFP kama vile EGFP yanapatikana. Kwa hivyo, hii huwezesha utumiaji mzuri wa GFP katika ujumuishaji wa molekuli na tafiti za usemi wa jeni.
EGFP ni nini?
Protini Iliyoboreshwa ya Fluorescent ya Kijani au EGFP ni toleo lililoboreshwa la GFP. Kwa maneno rahisi, tunaweza kufafanua EGFP kama toleo lililobuniwa la GFP ya aina ya mwitu. Wakati jeni la aina ya mwitu la GFP linapobadilika, hutoa athari za manufaa. Kwa hivyo, jeni iliyobadilishwa ya GFP inaruhusu usemi wa herufi mpya, na kutokana na hilo, tunaweza kutoa GFP Iliyoboreshwa na sifa zilizoboreshwa. Zaidi ya hayo, tunaweza kutambulisha mabadiliko kwa mafanikio katika jeni la aina ya GFP kwa kutumia miale au mbinu za kemikali. Jeni hizi zilizobadilishwa kisha hutoa EGFP, ambayo ina sifa za manufaa zaidi.
Kielelezo 02: EGFP
Sifa zilizoboreshwa za EGFP ni kama ifuatavyo;
- Inaweza kutoa mawimbi yenye nguvu zaidi ya umeme.
- Ina usikivu wa hali ya juu.
- Anaweza kuitumia kwenye seli za mamalia badala ya prokariyoti na yukariyoti nyingine za kiwango cha chini.
- Pia, hutoa ongezeko la usafi wa bidhaa.
Kwa hivyo, kwa kulinganisha na GFP, EGFP ndilo chaguo linalopendekezwa kwa masomo ya usemi wa jeni. Hata hivyo, bidhaa ni ghali zaidi ikilinganishwa na GFP.
Je, Kuna Ufanano Gani Kati ya GFP na EGFP?
- GFP na EGFP ni protini mbili ambazo zina uwezo wa kutoa rangi ya kijani
- Kwa hivyo, zote mbili hufanya kazi kama proteni za ripota katika tafiti za usemi wa jeni.
- Pia, inawezekana kusanisha zote mbili kwa kutumia teknolojia ya upatanishi ya DNA.
- Zaidi ya hayo, ni rahisi kubadilisha zaidi aina hizi mbili ili kusanisi fomu zilizoboreshwa.
Nini Tofauti Kati ya GFP na EGFP?
Jeni ya ripota ni jeni inayoshikamana na jeni inayovutia katika teknolojia ya DNA iliyojumuishwa tena. Inaashiria mabadiliko ya mafanikio ya vekta recombinant kwa mwenyeji. Hapa, GFP na EGFP ni aina mbili za protini za kijani kibichi zinazofanya kazi kama proteni za ripota. Walakini, tofauti kuu kati ya GFP na EGFP ni kwamba GFP ni aina ya pori wakati EGFP ni toleo la uhandisi la GFP. Zaidi ya hayo, EGFP ina sifa za manufaa zaidi kuliko GFP. Kwa mfano, EGFP hutoa mwanga wa umeme wenye nguvu zaidi na ni nyeti zaidi kuliko GFP. Tofauti nyingine kati ya GFP na EGFP ni mifumo ambayo tunaweza kutumia hizi. Mifumo isiyo ya mamalia hutumia GFP wakati mifumo ya mamalia hutumia EGFP.
Fografia iliyo hapa chini inawasilisha tofauti kati ya GFP na EGFP katika muundo wa jedwali.
Muhtasari – GFP dhidi ya EGFP
GFP na EGFP ni proteni za ripota katika ujumuishaji wa molekuli na tafiti za usemi wa jeni. GFP ni protini ya aina ya mwitu, ambayo ni protini ya kijani ya fluorescent. Protini hapo awali ilikuwa imetengwa na jellyfish Aequorea victoria. Kinyume chake, EFGP ni aina iliyoimarishwa ya protini ya GFP. Ni kigeugeu cha aina ya mwitu na sifa zilizoboreshwa. Kwa hivyo, EFGP ina nguvu ya juu ya ishara na unyeti wa juu. Kwa hiyo, tunaweza kuitumia kwenye vekta za mamalia. Kinyume chake, matumizi ya GFP ni hasa kwenye vekta zisizo za mamalia. Kwa jumla, hii ndiyo tofauti kati ya GFP na EGFP.
