Tofauti Muhimu – RPMI dhidi ya DEMM
Tafiti nyingi za utafiti zinahusisha ukuzaji wa seli za wanyama na kwa hivyo, tafiti hizi zinahitaji udumishaji wa mistari ya seli za wanyama chini ya hali maalum ya ukuaji. Ukuzaji wa seli za wanyama hufanywa sana katika tafiti za kifamasia ili kutambua kimetaboliki ya dawa, katika uchunguzi wa magonjwa na katika utafiti wa saratani. Vyombo vya habari vya utamaduni wa seli ni kipengele muhimu cha utamaduni wa seli za wanyama. Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) na Roswell Park Memorial Institute Medium (RPMI) ni media mbili za kitamaduni zinazotumika katika ukuzaji wa seli za wanyama. RPMI ni vyombo vya habari vinavyotumiwa sana kutayarisha seli za mamalia katika utamaduni wa kusimamishwa. DMEM ni aina iliyorekebishwa ya basal medium, yenye asidi ya amino iliyoongezeka na viwango vya vitamini hadi mara nne. DMEM hutumiwa katika kukuza seli katika tamaduni zinazofuata. Tofauti kuu kati ya vyombo hivi viwili vya habari ni aina ya utamaduni wa vyombo vya habari. RPMI inatumika kwenye tamaduni za kusimamishwa, ilhali DEMM inatumika kutayarisha seli zinazofuata.
RPMI ni nini?
RPMI au Roswell Park Memorial Institute Medium pia inajulikana kama RPMI 1640. Jina la vyombo vya habari lilitolewa na taasisi ambayo vyombo vya habari viligunduliwa. Vyombo vya habari hivi hutumiwa kwa kawaida katika utamaduni wa seli za wanyama, hasa kwa ukuaji wa seli za mamalia. Hapo awali zilitengenezwa ili kukuza lymphocyte za binadamu.
Viungo vifuatavyo vimejumuishwa kwenye RPMI.
- Glucose
- pH kiashiria (nyekundu ya phenoli)\
- Chumvi (kloridi ya sodiamu, bicarbonate ya sodiamu, fosfati ya disodium, kloridi ya potasiamu, salfati ya magnesiamu, na nitrati ya kalsiamu)
- Amino asidi
- Vitamini (i-inositol, kloridi ya choline, asidi ya para-aminobenzoic, asidi ya foliki, nikotinamidi, pyridoxine hydrochloride, thiamine hydrochloride, calcium pantothenate, biotin na riboflauini, cyanocobalamin)
Sifa maalum ya RPMI ni kuongezeka kwa ukolezi wa fosfati katika wastani. RPMI inatumika katika angahewa ya kaboni dioksidi 5%. Hii itatoa hali ya juu na bora kwa ukuaji wa seli. pH ya maudhui hudumishwa kuwa 8.0 na mfumo wa kuakibisha bicarbonate.
Kielelezo 01: Utamaduni wa Simu kwenye Mlo wa Petri
Matumizi ya RPMI katika Kilimo cha Simu
- Kukuza lymphocyte T na B binadamu, seli za uboho na hybridoma.
- Hutumika kuchunguza seli za neoplastiki za binadamu.
DMEM ni nini?
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) ni njia iliyorekebishwa ambayo imetayarishwa kibiashara. Muundo wa asili wa poda ya kati ni ya manjano. Katika DMEM, ukolezi wa vitamini huongezeka hadi mara nne na hivyo kuongeza maudhui ya virutubishi katikati.
DMEM pia inarekebishwa kwa kuongeza chumvi zaidi kama vile nitrati ya feri, pyruvate ya sodiamu na asidi ya amino zisizo muhimu kama vile serine na glycine. Uundaji wa glucose kwenye vyombo vya habari pia hubadilishwa. Muundo wa awali unajumuisha 1000 mg/L ya glukosi, ambapo katika DMEM, ukolezi huongezeka hadi 4500 mg/L. DEM pia inahitaji kuongezwa kwa serum medium kwani sio chombo kamili. Mara nyingi, DMEM huongezewa na Fetal Bovine Serum (FBS). FBS hutoa protini zinazohitajika na vipengele vya ukuaji kwa mchakato wa upanzi.
PH ya wastani hutofautiana kwa kuongezwa kwa Sodium Bicarbonate. pH ya kati kabla ya kuongeza Sodium Bicarbonate ni karibu 6.80 - 7.40, ambapo pH baada ya kuongeza Bicarbonate ya Sodiamu iko kati ya 7.60 - 8.20. Halijoto ya kuhifadhi ya kati ni 2 – 8 0C.
Kielelezo 02: DEM
Matumizi ya DEMM
- Kusoma uwezo wa kutengeneza utando wa virusi vya polyoma katika seli za kiinitete cha panya.
- Katika masomo ya kuzuia mawasiliano.
- Katika utafiti na uchambuzi wa tamaduni za seli za kuku.
Je, Kuna Ufanano Gani Kati ya RPMI na DEMM?
- RPMI na DEMM hutumika katika utamaduni wa seli za wanyama.
- Vyombo vya habari vya RPMI na DMEM ni uundaji wa kioevu.
- Vyombo vya habari vya RPMI na DMEM vina asidi muhimu ya amino, vitamini na chumvi isokaboni zinazohitajika kwa ukuaji.
- Midia ya RPMI na DEM haijakamilika. Kwa hivyo, seramu inapaswa kuongezwa.
- Vyombo vya habari vya RPMI na DMEM hutumia glukosi kama chanzo chake cha kaboni.
- Vyombo vya habari vya RPMI na DMEM vina pH ya juu zaidi.
Kuna tofauti gani kati ya RPMI na DMEM?
RPMI dhidi ya DEMM |
|
| RPMI ni chombo kinachotumiwa sana kueneza seli za mamalia katika utamaduni wa kusimamishwa. | DMEM ni aina iliyorekebishwa ya basal medium na kuongezeka kwa asidi ya amino na vitamini. |
| Uwepo wa Phosphates ya Ziada | |
| Sasa katika RPMI. | Haiko katika DEMM. |
| Tumia | |
|
Inatumika kwa seli za utamaduni katika tamaduni zinazofuata. Imezoea,
|
| Aina za Utamaduni | |
| RPMI inatumika kwa tamaduni za kusimamishwa. | DMEM inatumika kwa tamaduni zinazofuatwa na seli. |
Muhtasari – RPMI dhidi ya DEMM
RPMI na DMEM zote mbili hutumiwa sana katika ukuzaji wa seli za wanyama haswa kwa laini za seli za wanyama ikijumuisha lymphocyte in vitro. DMEM ni njia ya basal iliyorekebishwa ambapo kuna mkusanyiko wa virutubisho ulioongezeka. RPMI iliyotengenezwa na Taasisi ya Ukumbusho ya Roswell Park, na pia ni njia inayotumika katika ukuzaji wa seli za wanyama hasa kwa lymphocyte za mamalia. Vyombo vya habari vyote viwili vinapatikana kibiashara. Hii ndio tofauti kati ya RPMI na DMEM.
