Tofauti kuu kati ya uongezaji wa kinga mwilini na precipitation ni kwamba kinga-precipitation ni mbinu ambayo hutoa protini kutoka kwenye myeyusho kwa kutumia kingamwili mahususi, ilhali upenyezaji wa kingamwili ni mbinu inayotoa chanjo za protini zisizobadilika kutoka kwenye myeyusho kwa kutumia kingamwili mahususi.
Muingiliano wa antijeni-kimwili ni mwingiliano mahususi wa kemikali kati ya kingamwili zinazozalishwa na seli B na antijeni (protini) wakati wa mmenyuko wa kinga. Kwa kawaida, antijeni mumunyifu huchanganyika na kingamwili mumunyifu mbele ya elektroliti katika halijoto mumunyifu na pH ili kutengeneza changamano isiyoweza kufutwa inayoonekana. Hii inaitwa mmenyuko wa mvua. Kwa hivyo, upungufu wa kinga mwilini na uwekaji kinga mwilini ni aina mbili za athari za kunyesha ambazo hutumiwa mara kwa mara katika maabara kutambua protini kama vile antijeni.
Kupungua kwa kinga mwilini ni nini?
Kingamwili ni mbinu ya kutoa protini kutoka kwa myeyusho kwa kutumia kingamwili mahususi. Wakati mwingine, mbinu hii pia inajulikana kama immunoprecipitation ya mtu binafsi ya protini. Immunoprecipitation hutumia kingamwili kutenga protini iliyochaguliwa ya riba kutoka kwa seli za seli. Kingamwili husafisha protini inayolengwa au antijeni kutoka kwa mchanganyiko. Kingamwili hufungamana na protini, na changamano cha antibody-antijeni hutolewa nje ya sampuli. Katika usanidi wa majaribio, changamano ya antijeni-antibody hutolewa kwa kutumia protini A/G iliyounganishwa agarose au shanga za sumaku. Baadaye, shanga huosha, na protini ya riba hutolewa. Protini iliyosafishwa au antijeni inayopatikana kwa upunguzaji wa kinga mwilini inathibitishwa na mbinu mbalimbali kama vile kipimo cha kingamwili kilichounganishwa na kimeng'enya (ELISA) na blot ya magharibi (WB).
Kielelezo 01: Immunoprecipitation
Zaidi ya hayo, protini au antijeni zilizotengwa zinaweza kuhesabiwa na kutambuliwa kupitia spectrometry kubwa kwa kutumia mifumo ya umeng'enyaji wa enzymatic kulingana na mfuatano msingi. Kuna mambo fulani ya kuzingatia kabla ya kuanza jaribio la kuzuia upungufu wa kinga mwilini: chaguo la umbizo la mbinu, protini na shanga zinazofunga, kuchagua kingamwili na isotipu sahihi, na udhibiti hasi.
Kupungua kwa kinga mwilini ni nini?
Coimmunoprecipitation ni mbinu ya kutoa misombo ya protini isiyobadilika kutoka kwenye myeyusho kwa kutumia kingamwili mahususi. Upungufu wa kinga mwilini kwa ujumla hufanya kazi kwa kuchagua kingamwili mahususi inayolenga protini inayojulikana (antijeni) ambayo inaaminika kuwa mwanachama wa changamano kubwa zaidi la protini. Kwa kulenga mwanachama anayejulikana na kingamwili maalum, inawezekana kuvuta tata nzima ya protini nje ya suluhisho. Hii inawezesha kitambulisho cha wanachama wasiojulikana wa tata. Dhana ya kutoa unga wa protini nje ya myeyusho wakati mwingine hujulikana kama utaratibu wa "kuvuta chini".
Kielelezo 02: B Coimmunoprecipitation
Coimmunoprecipitation ni mbinu madhubuti ambayo hutumiwa kuchanganua mwingiliano wa protini na protini. Kusudi kuu la kutoa kinga moja kwa moja ni utambuzi wa washirika wanaoingiliana kama vile ligand, cofactors, au molekuli zinazoashiria protini inayovutia. Zaidi ya hayo, uchanganyiko wa kingamwili ni mbinu bora ambayo hutumiwa kutenganisha protini kutoka kwa seramu, seli za seli, tishu zilizo na homojeni, au vyombo vya habari vilivyowekwa.
Je, Kuna Ufanano Gani Kati ya Immunoprecipitation na Coimmunoprecipitation?
- Kinga dhidi ya mvua na upenyezaji wa kingamwili ni aina mbili za mbinu zinazotegemea majibu ya mvua.
- Mbinu zote mbili zinaweza kutumika kutambua antijeni lengwa kupitia kingamwili mahususi.
- Mbinu zote mbili zinategemea sana mwingiliano wa antijeni-antibody.
- Zinatumika mara kwa mara katika maabara za kimatibabu.
Kuna tofauti gani kati ya Immunoprecipitation na Coimmunoprecipitation?
Kinga dhidi ya mvua ni mbinu inayotoa protini kutoka kwenye myeyusho kwa kutumia kingamwili mahususi, ilhali uzuiaji wa kingamwili ni mbinu inayosababisha uchanganuzi wa protini usiobadilika kutoka kwenye myeyusho huo kwa kutumia kingamwili mahususi. Kwa hivyo, hii ndiyo tofauti kuu kati ya immunoprecipitation na coimmunoprecipitation. Zaidi ya hayo, upungufu wa kinga mwilini hutumika zaidi katika maabara, ilhali ugumu wa kinga dhidi ya mwili hautumiki kwa kawaida katika maabara.
Infografia iliyo hapa chini inawasilisha tofauti kati ya upungufu wa kinga mwilini na precipitation ya kingamwili katika mfumo wa jedwali kwa ulinganishi wa ubavu.
Muhtasari – Immunoprecipitation vs Coimmunoprecipitation
Uwepo wa kinga dhidi ya unyevunyevu na uwekaji upya wa kingamwili ni aina mbili za mbinu za mmenyuko wa mvua ambazo hutegemea mwingiliano wa antijeni na kingamwili. Mbinu ya kuzuia chanjo husababisha protini kutoka kwa suluhu kwa kutumia kingamwili mahususi, wakati mbinu ya kugandamiza kingamwili huchochea ugumu wa protini usiobadilika kutoka kwenye mmumunyo kwa kutumia kingamwili maalum. Kwa hivyo, hii ni muhtasari wa tofauti kati ya upungufu wa kinga mwilini na precipitation.
