Tofauti kuu kati ya chachu mseto mmoja na chachu mseto wa pili ni kwamba chachu mseto mmoja ni kipimo cha in vitro cha kuchanganua mwingiliano wa DNA-protini ilhali yeast two hybrid ni kipimo cha in vitro cha kuchanganua mwingiliano wa protini na protini.
Kusoma mwingiliano kati ya molekuli za seli kunaweza kusaidia kufafanua tovuti za utambuzi zinazohusika katika usemi wa jeni na njia za protini. Mwingiliano wa DNA na protini ni muhimu kwa michakato ya seli kama vile marekebisho ya DNA na udhibiti wa unukuzi, n.k. Kwa upande mwingine, mwingiliano wa protini na protini hutekeleza majukumu muhimu katika michakato ya seli kama vile urudufishaji, unukuzi, tafsiri na upakuaji wa mawimbi. Kwa hivyo, ni muhimu sana kutambua mwingiliano huu wa molekuli za seli kupitia majaribio tofauti. Chachu mseto mmoja na chachu mbili mseto ni majaribio mawili ya in vitro ya kuchanganua mwingiliano wa DNA-protini na protini-protini.
Mseto wa Yeast One ni nini?
Yeast one hybrid (Y1H) ni kipimo cha in vitro cha kuchanganua mwingiliano wa DNA-protini ndani ya seli. Njia hii ilianzishwa kwanza na Wang na Reed mwaka 1993. Tangu wakati huo, imeonyesha nguvu kubwa katika utafiti wa kibiolojia. Katika tathmini hii, kuna sehemu kuu mbili: chambo cha DNA na mawindo ya protini.
Kielelezo 01: Chachu Mseto Mmoja
Katika utaratibu huo, mlolongo wa DNA (chambo cha DNA) hutengenezwa kwa mara ya kwanza juu ya mkondo wa wanahabari wawili tofauti (HIS3, LacZ). Miundo hii ya wanahabari imeunganishwa kwenye jenomu ya aina ya chachu. Sababu za maandishi huchukuliwa kama mawindo ya protini. Vipengele vya uandishi vimeunganishwa kwenye kikoa cha kuwezesha maandishi (AD) cha chachu ya kipengele cha unukuzi cha Gal4 ili kutengeneza protini mseto. Protini hii yote ya mseto imeunganishwa kwenye plasmid kabla ya kuiingiza kwenye aina ya chachu. Baada ya kuanzishwa kwa plasmid recombinant, wakati kipengele cha transcriptional kinaingiliana na kipande cha DNA, sehemu ya AD inawasha usemi wa jeni la mwandishi (HIS3 au LacZ). Kupanga plasmidi huruhusu utambuzi wa sababu ya maandishi ambayo inaweza kushikamana na kipande cha DNA. Hivi majuzi, chachu njia moja ya mseto ilitumika kutafiti utambuzi wa magonjwa. Kwa hivyo, katika siku zijazo, jaribio hili litatumika kwa upana zaidi katika utafiti wa kisayansi na matibabu.
Chachu Mbili Mseto ni nini?
Yeast two hybrid (Y2H) ni kipimo cha in vitro cha kuchanganua mwingiliano wa protini na protini ndani ya seli. Mbinu hii ilipatikana awali na Stanley Fields na Ok-Kyu Song mwaka wa 1989. Mbinu hii hutambua mwingiliano wa protini-protini kwa kutumia kipengele cha unukuzi cha Gal4 cha chachu.
Kielelezo 02: Chachu Mseto Mbili
Katika mbinu hii, michanganyiko miwili (mseto) hutengenezwa kwanza kwa kutumia protini zinazovutia: kuunganisha protini moja na kikoa kinachofunga DNA (DBD) na kwa kuunganisha protini nyingine na kikoa cha kuwezesha (AD) cha kipengele cha unukuzi cha Gal4.. Protini iliyounganishwa na DBD inajulikana kama chambo wakati, protini iliyounganishwa na AD inajulikana kama mawindo. Katika aina ya chachu, baada ya mwingiliano wa chambo na mawindo, DBD na AD huletwa kwa ukaribu ili kuzalisha kipengele kinachofanya kazi cha unakili cha Gal4 juu ya mkondo wa jeni la ripota. Kipengele cha unukuzi hufanya kazi kuwezesha usemi wa jeni la ripota. Zaidi ya hayo, mbinu hii kwa sasa inatumika kukagua mwingiliano wa protini shirikishi za utando katika seli za mamalia.
Je, Kuna Ufanano Gani Kati ya Chachu Mseto Mmoja na Chachu Mseto Mbili?
- Chachu mseto mmoja na chachu mbili mseto ni majaribio mawili ya in vitro ya kuchanganua mwingiliano wa DNA-protini na protini-protini.
- Vipimo hivi hutumia aina ya chachu.
- Majaribio yote mawili yanatumia kikoa cha kuwezesha (AD) cha kipengele cha unukuzi cha Gal4.
- Wanatumia usemi wa jeni la ripota (HIS3, au LacZ) ili kugundua mwingiliano.
- Wana chambo na mawindo.
- Majaribio yote mawili ni muhimu sana katika utafiti wa kisasa wa kibiolojia.
Kuna Tofauti Gani Kati Ya Chachu Mseto Mmoja na Chachu Mseto Mbili?
Yeast one hybrid ni kipimo cha in vitro cha kuchanganua mwingiliano wa DNA na protini huku yeast two hybrid ni kipimo cha in vitro cha kuchanganua mwingiliano wa protini na protini. Kwa hivyo, hii ndio tofauti kuu kati ya chachu ya mseto mmoja na chachu ya mseto wa pili. Zaidi ya hayo, katika chachu ya mseto mmoja, chambo ni kipande cha DNA, na mawindo ni molekuli ya protini. Kwa upande mwingine, katika chachu mbili mseto, chambo na mawindo ni molekuli za protini.
Infografia iliyo hapa chini inaorodhesha tofauti kati ya chachu ya mseto wa kwanza na chachu ya mseto wa pili katika umbo la jedwali kwa kulinganisha ubavu.
Muhtasari – Chachu Moja Mseto vs Yeast Two Hybrid
Chachu mseto mmoja na mseto wa yeast two ni vipimo viwili muhimu vya in vitro. Chachu ya mseto mmoja ni jaribio la msingi la kuchambua mwingiliano wa DNA na protini huku chachu ya mseto wa pili ni jaribio la kuchambua mwingiliano wa protini na protini. Kwa hivyo, hii ndiyo tofauti kuu kati ya chachu ya mseto mmoja na chachu ya mseto wa pili.
