Tofauti kuu kati ya BL21 na DH5 Alpha ni kwamba BL21 ina upungufu wa protease yenye uwezo wa kutengenezwa kijenetiki E. seli ya E. coli inayotumiwa hasa kwa kujieleza kwa protini, huku DH5 Alpha ni chembechembe za E. koli zenye uwezo wa kiuhandisi na mabadiliko ya recA1 hutumika kimsingi. kwa mabadiliko ya plasmid.
E. coli ni mojawapo ya viumbe maarufu vya kuchagua kwa ajili ya uzalishaji wa protini recombinant. Imekuwa jukwaa maarufu zaidi la kujieleza kwa miaka. Pia hutumiwa kama kiwanda cha seli. BL21 na DH5 Alpha ni seli mbili za E. koli zilizoundwa kijenetiki zinazotumika sasa kwa usemi wa protini na mabadiliko ya plasmid, mtawalia.
BL21 ni nini?
BL21 ni chembechembe ya E.coli yenye upungufu wa protini ya vinasaba, ambayo hutumika hasa kwa usemi wa protini. E. coli BL21 ni seli ya bakteria inayotokana na aina ya B. Ina kasoro za Lon protease na ompT outer membrane protease. Inatumika kwa kawaida kwa usemi wa protini recombinant kwa sababu kawaida huleta uthabiti kwa protini zilizoonyeshwa. BL21 ni muhimu kwa kujieleza kwa protini na pCold I-IV DNA na pCold TF DNA. Lakini kiini hiki cha E. koli kinachofaa hakikusudiwa kwa mfumo wa kujieleza kwa protini kwa kutumia kikuzaji cha T7 kama vile mfumo wa pET. Sababu nyuma ya hii ni BL21 haionyeshi T7 RNA polymerase. Zaidi ya hayo, haipendekezwi kutumika kwa ajili ya ujenzi au utayarishaji wa plasmid kwa kuwa haina mabadiliko ya recA.
Kielelezo 01: BL21
BL21 ilielezewa kwa mara ya kwanza na Studier mnamo 1986 baada ya marekebisho kadhaa ya laini B. Seli za BL21 zina upungufu katika LON protease, ambayo huharibu protini nyingi za kigeni. Zaidi ya hayo, inakosa jeni lingine ambalo huweka misimbo ya protease ya membrane ya nje (OmpT) ambayo kazi yake ni kuharibu protini za ziada. Ukosefu wa protini hizi huchochea uzalishaji wenye mafanikio wa protini ngeni katika seli za E. koli BL21. Zaidi ya hayo, mabadiliko ya hsdSB katika seli hizi huzuia methylation ya kigeni ya DNA na usumbufu katika seli za BL21.
DH5 Alpha ni nini?
DH5 Alpha ni seli ya E. koli yenye uwezo uliobuniwa vinasaba na mabadiliko ya recA1 ambayo hutumiwa kimsingi kwa mabadiliko ya plasmid. Seli za DH5 Alpha E. coli zimeundwa kijeni na mwanabiolojia wa Marekani Douglas Hanahan ili kuongeza ufanisi wa mabadiliko. Seli ya DH5 Alpha ina mabadiliko matatu tofauti: recA1, endA1, na lacZΔM15. recA1 ni mabadiliko ya nukta moja ambayo huchukua nafasi ya glycine 160 na mabaki ya asidi aspartic katika recA polipeptidi. Ubadilishaji huu huzima shughuli za recombinases na kuzima ujumuishaji wa homologous. EndA1 mabadiliko huzima endonuclease ya ndani ya seli ambayo huizuia kuharibu plasmid iliyoingizwa.
Kielelezo 02: DH5 Alpha
Aidha, mabadiliko ya lacZΔM15 huwezesha uchunguzi wa bluu-nyeupe wa seli zilizobadilishwa. Seli hizi ni seli zenye uwezo. Mara nyingi hutumiwa na mabadiliko ya kloridi ya kalsiamu ili kuingiza plasmid inayotaka. Ilibainishwa na utafiti wa hivi majuzi kuwa seli ya DH5 Alpha iliyo na mbinu ya Hanahan ilikuwa seli ifaayo zaidi ya kubadilisha plasmid.
Je, Ni Nini Zinazofanana Kati ya BL21 na DH5 Alpha?
- BL21 na DH5 Alpha ni E.coli iliyotengenezwa kwa vinasaba
- Zote mbili ni seli zinazofaa.
- Zinajumuisha mabadiliko mahususi.
- Zote mbili hazina makazi asilia.
- Hizi hutumika kwa madhumuni ya kimaabara kama vile masomo ya usemi na taratibu za uundaji.
Nini Tofauti Kati ya BL21 na DH5 Alpha?
BL21 ni chembechembe ya E. koli yenye upungufu wa protini ya vinasaba, ambayo hutumiwa hasa kwa usemi wa protini. Kwa upande mwingine, DH5 Alpha ni seli ya E. koli iliyobuniwa kijenetiki yenye mabadiliko ya recA1 ambayo hutumika hasa kwa mabadiliko ya plasmid. Kwa hivyo, hii ndiyo tofauti kuu kati ya BL21 na DH5 Alpha. Zaidi ya hayo, seli ya BL21 E. coli haina mabadiliko ya recA1, ilhali seli ya DH5 Alpha E. coli haina mabadiliko ya recA1.
Infographic ifuatayo inaorodhesha tofauti kati ya BL21 na DH5 Alpha katika muundo wa jedwali.
Muhtasari – BL21 dhidi ya DH5 Alpha
Aina zisizo na pathojeni za E. koli hutengenezwa kijeni na wanasayansi kwa ajili ya tafiti za usemi wa kimaabara na madhumuni ya kuiga. BL21 na DH5 Alpha ni seli mbili za E. koli zilizoundwa kijeni. BL21 hutumiwa kimsingi kwa masomo ya usemi wa protini. Kwa upande mwingine, DH5 Alpha hutumiwa kimsingi kwa madhumuni ya mabadiliko ya plasmid. Kwa hivyo, huu ni muhtasari wa tofauti kati ya BL21 na DH5 Alpha.
