Tofauti kuu kati ya awamu ya nyuma na awamu ya kawaida ya HPLC ni kwamba awamu ya nyuma HPLC hutumia awamu ya stationary isiyo na ncha na awamu ya rununu ya polar ilhali awamu ya kawaida ya HPLC hutumia awamu ya stationary ya polar na awamu ya simu ya chini ya polar.
HPLC ya awamu ya kawaida ndiyo mbinu kongwe zaidi ya HPLC ambayo Tswett alitumia katika mgawanyo wake wa dondoo za mimea; alitumia chaki kwenye safu ya glasi. Hii ilikuwa hali ya kitamaduni ya kromatografia iliyopelekea kuitaja kama mbinu ya "kawaida". HPLC ya awamu iliyogeuzwa, kwa upande mwingine, ni kinyume cha mbinu ya kawaida, ambayo wanasayansi waliitengeneza hivi majuzi.
Je, HPLC ya Awamu ya Reverse ni nini?
Awamu ya Kugeuza HPLC ni mbinu ya kromatografia ambayo tunatumia awamu ya kusimama haidrofobi. Miongoni mwa mbinu zote za HPLC, tunatumia njia hii kwa takriban 70% kwa sababu ya utumiaji wake mpana, na uzalishwaji tena. Awamu ya kusimama sio ya ncha na awamu ya rununu ni ya polar.
Mara nyingi, wanasayansi hutumia mchanganyiko wa maji yenye mchanganyiko, kiyeyushi kikaboni cha polar, kama vile asetonitrile au methanoli kama awamu ya rununu. Kwa hivyo, wachanganuzi huingiliana na awamu ya stationary isiyo ya polar.
HPLC ya Awamu ya Kawaida ni nini?
HPLC ya Awamu ya Kawaida ni mbinu ya kromatografia ambapo tunatumia awamu ya hydrophilic stationary. Ni njia ya kitamaduni ya HPLC, ingawa hatuitumii sana. Awamu ya stationary ni polar, na awamu ya simu ni nonpolar. Muhimu zaidi, awamu ya simu ya mbinu hii ni 100% ya kikaboni. Inamaanisha kuwa hakuna maji yanayotumika kwa hili.
Kielelezo 01: Sampuli ya wasifu wa kromatogramu za awamu ya kawaida na awamu ya nyuma za HPLC kulingana na mgawanyiko wa vijenzi katika kichanganuzi.
Kwa kawaida, awamu ya kusimama huwa na silika, siano, diol, awamu zilizounganishwa za amino, n.k. Awamu za rununu hujumuisha viyeyusho vya kikaboni kama vile hexane, acetate ya ethyl, n.k. Mbinu hii inategemea uwekaji wa chembechembe za kutengenezea au uchanganuzi kwenye polar stationary awamu.
Nini Tofauti Kati ya Awamu ya Nyuma na Awamu ya Kawaida HPLC?
Awamu ya Kugeuza HPLC ni mbinu ya kromatografia ambayo tunatumia awamu ya kusimama haidrofobi. Awamu ya stationary ya mbinu hii ni nonpolar wakati awamu ya simu ni polar. Zaidi ya hayo, wanasayansi hutumia mchanganyiko wa maji yenye mchanganyiko, kiyeyushi kikaboni cha polar, kama vile asetonitrile au methanoli kama awamu ya rununu katika awamu ya nyuma ya HPLC. Kinyume chake, HPLC ya awamu ya kawaida ni mbinu ya kromatografia ambapo tunatumia awamu ya hydrophilic stationary. Awamu ya stationary ya mbinu hii ni polar wakati awamu ya simu ni nonpolar. Kando na hayo, wanasayansi hutumia vimumunyisho vya kikaboni kama vile hexane, acetate ya ethyl, n.k. kama awamu ya rununu ya awamu ya kawaida ya HPLC. Infografia iliyo hapa chini inawasilisha tofauti kati ya awamu ya nyuma na awamu ya kawaida ya HPLC katika muundo wa jedwali.
Muhtasari – Awamu ya Nyuma dhidi ya Awamu ya Kawaida HPLC
Awamu ya kurudi nyuma na mbinu za awamu ya kawaida za HPLC ni mbinu mbili za kromatografia kioevu. Tofauti kuu kati ya awamu ya nyuma na awamu ya kawaida ya HPLC ni kwamba awamu ya nyuma HPLC hutumia awamu ya stationary isiyo na ncha na awamu ya simu ya polar ambapo awamu ya kawaida ya HPLC hutumia awamu ya stationary ya polar na awamu ya chini ya simu ya polar.
