Tofauti kuu kati ya HPLC na HPLC ya haraka ni kwamba shinikizo la pampu tunalotumia kwa HPLC ni karibu MPa 40 ilhali shinikizo la pampu kwa HPLC ya haraka ni karibu 3-5 MPa.
Mbinu ya kawaida tunayotumia kutenganisha vijenzi vya mchanganyiko ni "kromatografia ya maji". Kuna mbinu kadhaa za kufikia lengo hili ambalo HPLC ni maarufu sana. HPLC inawakilisha Chromatografia ya Utendaji wa Juu ya Kioevu ambayo hutambua, kubainisha na kutenganisha vipengele vya mchanganyiko wa kioevu kwa njia ya haraka na bora. Fast HPLC ni programu maalum ya HPLC ambayo imevutia umakini wa wale wanaohusika katika utafiti wa suluhisho.
HPLC ni nini?
HPLC ni kromatografia ya kioevu yenye utendaji wa juu. Inafanya matumizi ya shinikizo la juu kusukuma vimumunyisho ili wapite kwenye safu. Pia, ni njia bora ya kutenganisha na kusoma misombo mbalimbali kama vile amino asidi, asidi nucleic, wanga, steroids, antibiotics na hidrokaboni. HPLC ina faida nyingi juu ya njia zingine za utenganishaji wa mchanganyiko kama vile azimio la juu na uchanganuzi wa haraka. Inafuta haja ya kufunga upya na kuzaliwa upya na inatoa udhibiti bora wa vigezo na hivyo, kuongeza ufanisi wa kujitenga. Kimsingi, HPLC inafaa kwa matumizi ya kiwango kikubwa kwani inaweza kutenganisha chembe ndogo sana na kuruhusu matumizi ya shinikizo la juu ambalo hurahisisha viyeyusho kutiririka kwa urahisi.
Kielelezo 01: Safu wima ya HPLC
Kwa ufupi, mbinu ya utendakazi wa mbinu ya HPLC ni kama ifuatavyo. Kwanza, tunapaswa kuanzisha sampuli kwenye mkondo wa awamu ya simu kwa kiasi kidogo kwa kutumia pampu. Shinikizo la pampu linapaswa kudumishwa kwa 40 MPa. Mtiririko huu wa awamu ya rununu hupitia safu ya HPLC. Kisha, vipengele katika sampuli pia hupitia safu. Hata hivyo, kasi yao ya harakati hutofautiana kutoka kwa kila mmoja kwa sababu ya tofauti katika mwingiliano kati ya vipengele vya sampuli na adsorbent ndani ya safu. Tunaita adsorbent hii kama awamu ya kusimama kwa sababu inakaa ndani ya safu (bila kusonga). Kisha, mwishoni mwa safu wima, tunaweza kukusanya sampuli inayotolewa kutoka kwa safu, kwa hivyo, tunaweza kukusanya vijenzi kwenye sampuli tofauti.
Haraka HPLC ni nini?
Hivi majuzi, wanasayansi watafiti katika taasisi ya utafiti ya Schering Plow walitengeneza mbinu ya haraka ya HPLC ambayo ni toleo la hali ya juu la HPLC kwani inaruhusu utenganishaji wa haraka wa misombo kutoka kwa mchanganyiko. Pia, inayojulikana kama HPLC ya haraka, mbinu hii hutumia chembechembe za msingi za silika zilizounganishwa za 2.7um ambazo hutengenezwa kwa kuunganisha silika yenye vinyweleo vya 0.5um juu ya chembe dhabiti ya silika. Chembe hizi zilizotengenezwa kwa njia ya kipekee hufanya utaratibu wa utenganishaji kuwa haraka sana na ambao pia kwa shinikizo la chini kuliko kile tunachotumia katika HPLC.
Kielelezo 02: Vifaa vya FPLC
HPLC ya haraka hupata matokeo yanayolingana na UPLC, lakini wanasayansi wanaona kuwa mbinu hii ni bora zaidi kwa kuwa haihitaji vifaa vya bei ghali sana vya shinikizo la juu. Kinachopendeza ni kwamba HPLC ya haraka haihitaji itifaki zozote mpya za maabara.
Nini Tofauti Kati ya HPLC na Fast HPLC?
HPLC ni kromatografia ya kioevu yenye utendaji wa juu na HPLC ya haraka ni aina ya hali ya juu ya kromatografia kioevu yenye utendaji wa juu. Tofauti kuu kati ya HPLC na HPLC ya haraka ni kwamba shinikizo la pampu tunayotumia kwa HPLC ni karibu 40 MPa. Wakati, shinikizo la pampu kwa HPLC ya haraka ni karibu 3-5 MPa. Zaidi ya hayo, tunaweza kutenganisha misombo tofauti kama vile amino asidi, asidi nucleic, wanga, steroidi, antibiotics na hidrokaboni kwa kutumia mbinu ya HPLC huku mbinu ya haraka ya HPLC inatumika hasa kutenganisha protini.
Infographic hapa chini inawasilisha taarifa zaidi kuhusu tofauti kati ya HPLC na HPLC ya haraka.
Muhtasari – HPLC dhidi ya Fast HPLC
HPLC ni mbinu ya kromatografia kimiminika ambayo imekuwa maarufu sana duniani kote. Fast HPLC ni toleo jipya la HPLC, wanasayansi watafiti katika Taasisi ya Schering Plow walitengeneza mbinu hii mpya. Tofauti kuu kati ya HPLC na HPLC ya haraka iko kwenye shinikizo la pampu tunayotumia kutenganisha. Hiyo ni; shinikizo la pampu tunayotumia kwa HPLC ni karibu 40 MPa. Lakini, shinikizo la pampu kwa HPLC ya haraka ni karibu MPa 3-5.
