Tofauti Muhimu – Karatasi dhidi ya Tabaka Nyembamba dhidi ya Safu wima Chromatography
Kromatografia ya karatasi, kromatografia ya safu nyembamba, na kromatografia ya safu wima ni aina tatu za mbinu za kromatografia. Tofauti kuu kati ya kromatografia ya karatasi, kromatografia ya safu nyembamba na kromatografia ya safu zinatokana na aina ya awamu ya kusimama inayotumiwa katika mbinu ya kromatografia. Kromatografia ya karatasi hutumia karatasi ya selulosi kama awamu yake ya kusimama, kromatografia ya Tabaka Nyembamba hutumia alumina au gel ya silika kama awamu yake ya kusimama, ilhali kromatografia ya Safu hutumia safu iliyojaa nyenzo inayofaa ya matrix kama awamu yake ya kusimama.
Katika mchakato wa kutenganisha na kutambua molekuli za kibayolojia kama vile protini na wanga, kromatografia ni mbinu muhimu ya kibiolojia inayotumika. Chromatografia hutenganisha misombo kulingana na umumunyifu, ukubwa na chaji. Kulingana na utaratibu wa utenganishaji, kromatografia hutumia mbinu kama vile kubadilishana ioni, ufyonzaji, kugawanya na kutengwa kwa ukubwa na kuna mbinu tatu za kromatografia; yaani, karatasi, safu nyembamba, na kromatografia ya safuwima. Kromatografia ya karatasi inategemea utengamano wa kioevu-kioevu na umumunyifu wa kiwanja, na hutumia karatasi ya selulosi kama awamu ya kusimama. Kromatografia ya safu nyembamba inategemea utangazaji wa kioevu-kioevu wa molekuli. Ina awamu ya kusimama ambayo kwa kawaida hutengenezwa na alumina au gel ya silika na awamu ya simu ambayo ni kutengenezea. Safu wima kromatografia hutumia safu wima iliyopakiwa na matriki ambayo hutumiwa kutenganisha molekuli hasa kulingana na saizi yao, mshikamano au chaji yake.
Paper Chromatography ni nini?
Kromatografia ya karatasi ndiyo aina rahisi zaidi ya kromatografia inayotumika, na haitumiki kwa utafiti wa kina. Hutumiwa zaidi katika maabara za wanafunzi kutambua biomolecules kama vile amino asidi na wanga zilizopo katika mchanganyiko. Kromatografia ya karatasi hutumia awamu ya kusimama ambayo hutengenezwa kwa karatasi ya selulosi au karatasi ya chujio ya Whatman na awamu inayohamishika ambayo kwa kawaida hutayarishwa kwa kutumia vimumunyisho vya kikaboni kama vile n-butanol, n.k. Awamu ya kusimama hujaa maji, na kufanya awamu isiyosimama iwe kioevu. Kwa hivyo, wakati misombo inapoonekana na kuruhusiwa kukimbia mbele ya awamu ya simu, kulingana na umumunyifu wa misombo, hutenganishwa. Kwa hivyo, juu ya maendeleo ya chromatogram, uchafu unaweza kufanywa ili kuamua urefu wa kukimbia wa kila kiwanja. Kipengele cha kubaki kinaweza kuhesabiwa.
Kielelezo 01: Chromatography ya Karatasi
Kromatografia ya karatasi inaweza kuainishwa zaidi kuwa kromatografia ya karatasi inayopanda na kromatografia ya karatasi inayoshuka kulingana na mwelekeo wa kiyeyushi kinachoendelea.
Chromatography ya Tabaka Nyembamba ni nini?
Kromatografia ya safu nyembamba au TLC ni mbinu inayotumiwa sana kutambua asidi tofauti za amino zilizopo kwenye mchanganyiko au kwa ajili ya utambuzi wa protini. Mbinu ya kujitenga inategemea adsorption ya kioevu-imara. Wakati wa kromatografia ya safu nyembamba, sahani iliyotengenezwa kwa alumina au gel ya silika hutumiwa kama awamu ya kusimama. Mchanganyiko wa kutengenezea hutofautiana kulingana na mahitaji na unaweza kutumia michanganyiko tofauti ya misombo ya kikaboni kama vile n-butanoli, asidi asetiki na maji kuandaa kiyeyushio. Misombo ya kutenganishwa huonekana kwenye sahani na kuingizwa kwenye mchanganyiko wa kutengenezea. Mara tu kutengenezea kunaposafiri juu kulingana na hatua ya kapilari iliyotolewa na sahani, misombo inayoonekana kwenye sahani pia husogea kulingana na umumunyifu wao katika kutengenezea.
Kielelezo 02: Chromatografia ya Tabaka Nyembamba
Ugunduzi wa madoa baada ya kromatogramu hufanywa kwa taratibu tofauti za uwekaji madoa. Wengine hutumia rangi ya ninhydrin ambayo ni njia yenye sumu ya kutia rangi. Chromatogram za kisasa za safu nyembamba hutumia mbinu za fluorescence kutazama chromatogram baada ya kukimbia. Kulingana na umbali ambao umesafiri, muda wa kuhifadhi wa kila kiwanja unaweza kuhesabiwa. Hii inaweza kutumika kutambua aina ya kiwanja kilichotenganishwa kulingana na mchanganyiko uliotumiwa. TLC hutumiwa hasa kutambua amino asidi katika mchanganyiko wa protini na pia kutenganisha aina tofauti za monosakharidi zilizopo kwenye mchanganyiko.
Chromatography ya Safu ni nini?
Kromatografia ya safu wima ni neno pana linalotumiwa kuelezea aina nyingi za mbinu za kromatografia zinazotumia mbinu ya utenganisho wa safu wima. Katika chromatography ya safu, safu ya kimwili hutumiwa na nyenzo za kufunga ili kutenganisha misombo. Utengano unaweza kutegemea mali tofauti za kimwili zinazoonyeshwa na misombo. Sifa hizi zinaweza kuwa chaji, saizi, upatanisho wa 3D na uwezo wa kufunga, n.k. Kwa hivyo, safu wima iliyojaa nyenzo ya matrix hufanya kama awamu ya kusimama na bafa ya kuosha inayotumiwa kwenye safu hufanya kama awamu ya simu.
Molekuli zikitenganishwa kulingana na saizi, nyenzo ya kupakia hupakiwa kwa njia ambayo huacha vinyweleo ili viambajengo kupita. Kwa hivyo, molekuli kubwa zaidi ambazo haziwezi kutiririka kupitia vinyweleo hutambulishwa kwanza, ilhali molekuli ndogo huchukua muda mrefu zaidi kutoweka.
Kielelezo 03: Safu Wima Chromatography
Molekuli zikitenganishwa kulingana na chaji yao, awamu ya kusimama itakuwa na anioni au kibadilisha sauti ambapo misombo itavutiwa kulingana na chaji yao. Hivyo wakati wa hatua ya kuosha, misombo isiyo ya kufungwa itatolewa. Baada ya kuongeza bafa ya elution, misombo inayochajiwa itatolewa. Ugunduzi wa vidokezo hivi hutegemea zaidi mbinu za spectrophotometric.
Je, Kuna Ufanano Gani Kati ya Tabaka Nyembamba la Karatasi na Chromatography ya Safu wima?
- Tabaka Zote Nyembamba za Karatasi na Safu Safu Mbinu tatu za Kromatografia hutumika kutenganisha chembechembe za kibayolojia kama vile amino asidi, protini na wanga.
- Tabaka Nyembamba ya Karatasi na Mbinu za Kromatografia ya Safu zina awamu ya simu na awamu ya kusimama.
- Tabaka Nyembamba ya Karatasi na Mbinu za Kromatografia ya Safu hutumia mbinu za kibiofizikia kutenganisha.
Kuna Tofauti gani Kati ya Tabaka Nyembamba la Karatasi na Chromatography ya Safu wima?
Karatasi dhidi ya Tabaka Nyembamba dhidi ya Safu wima Chromatography |
|
| Paper Chromatography | Kromatografia ya karatasi ni mbinu ya kromatografia inayotumiwa kutenganisha misombo kulingana na utengamano wa kioevu-kioevu na umumunyifu wa kiwanja. Inatumia karatasi ya selulosi kama awamu yake ya kusimama. |
| Chromatography ya Tabaka Nyembamba | Kromatografia ya safu nyembamba ni mbinu nyingine ya kromatografia kulingana na utengamano wa kioevu-kioevu wa molekuli. Ina sehemu ya kusimama iliyotengenezwa kwa alumina au jeli ya silika na kiyeyusho kama sehemu inayotembea, ambayo ni kiyeyusho. |
| Safu wima Chromatography | Kromatografia ya safu wima hutumia safu wima iliyopakiwa na matrix ambayo hutumiwa kutenganisha molekuli hasa kulingana na saizi yao, mshikamano au chaji yake. |
| Awamu ya stationary | |
| Paper Chromatography | Karatasi iliyotengenezwa kwa nitrocellulose ya Whatman inatumika kama hatua ya kusimama katika kromatografia ya karatasi. |
| Chromatography ya Tabaka Nyembamba | Alumina au jeli ya Silika hutumika kama awamu ya kusimama ya kromatografia ya safu nyembamba. |
| Safu wima Chromatography | Safu wima iliyojaa nyenzo zinazofaa za kufunga hutumika kama hatua ya kusimama katika kromatografia ya safu wima. |
| Awamu ya Simu | |
| Paper Chromatography | Kiyeyushi kinachoendesha ni awamu ya simu ya kromatografia ya karatasi. |
| Chromatography ya Tabaka Nyembamba | Kiyeyushi kinachoendesha ni awamu ya simu ya kromatografia ya safu nyembamba. |
| Safu wima Chromatography | Bafa ya kuosha ni awamu ya simu ya kromatografia ya safu wima. |
| Taratibu Zinazotumika kwa Utengano | |
| Paper Chromatography | Kromatografia ya karatasi inategemea ufyonzaji wa kioevu-kioevu. |
| Chromatography ya Tabaka Nyembamba | kromatografia ya safu nyembamba inategemea ufyonzaji wa kioevu-kioevu. |
| Safu wima Chromatography | Kromatografia ya safu wima inategemea kutojumuisha ukubwa, chaji na umbo. |
| Elution Buffer | |
| Paper Chromatography | Hahitajiki kwa kromatografia ya karatasi. |
| Chromatography ya Tabaka Nyembamba | Hahitajiki kwa kromatografia ya safu nyembamba. |
| Safu wima Chromatography | Inahitajika katika kromatografia ya safu wima. |
| Ugunduzi | |
| Paper Chromatography | Kuweka rangi na kwa kubainisha kipengele cha Uhifadhi. |
| Chromatography ya Tabaka Nyembamba | Kuweka rangi na kwa kubainisha kipengele cha Uhifadhi. |
| Safu wima Chromatography | Uamuzi wa Spectrophotometric. |
Muhtasari – Tabaka Nyembamba la Karatasi dhidi ya Safu wima Chromatografia
Kromatografia ya karatasi, TLC na kromatografia ya safuwima ni mbinu za utenganisho zinazotumiwa kutenganisha molekuli za kibayolojia kama vile protini, amino asidi na wanga (hasa monosakaridi). Kromatografia ya karatasi hutumia karatasi ya selulosi kama awamu ya kusimama, na utaratibu wa kutenganisha unategemea utangazaji wa kioevu-kioevu. TLC pia hutumia njia za utangazaji za kioevu-kioevu. Molekuli hutenganishwa kwenye awamu ya kusimama, kulingana na umumunyifu wao katika awamu ya simu. Kromatografia ya safu wima hutumia sifa halisi kama vile saizi, umbo, chaji na uzito wa molekuli ya kiwanja kutenganisha. Safu iliyojaa nyenzo ya matrix hufanya kama awamu ya kusimama, ilhali bafa ya kuosha hufanya kazi kama awamu ya kutengenezea. Hii ndio tofauti kati ya safu nyembamba ya karatasi na kromatografia ya safu wima.
