Tofauti Muhimu – Phusion vs Taq Polymerase
polima za DNA ni vimeng'enya vinavyotumika sana katika mbinu za baiolojia ya molekuli na pia kwa kawaida hupatikana katika viumbe vyote vinavyojirudiarudia DNA. Ni vimeng'enya muhimu vya upolimishaji vinavyohusika wakati wa kurudia. DNA polymerase ina uwezo wa kuongeza nyukleotidi kwenye ncha ya bure ya 3' ya uzi wa DNA na hivyo kusababisha upanuzi wa uzi mpya. Kwa sasa, kutokana na maendeleo ya biolojia ya molekuli katika uchunguzi wa magonjwa na maombi ya viwanda, ni muhimu kutengeneza polymerases kuwa na mali mbalimbali za manufaa. Hii huongeza usahihi wa njia na kuifanya mbinu ya haraka zaidi. Phusion na Taq polymerase ni vimeng'enya viwili vya polimerasi vinavyoweza joto vinavyozalishwa kibiashara ambavyo hutumika katika matumizi maalum ya molekuli. Phusion ni polimerasi ya DNA iliyotengwa na Pyrococcus furiosus na hutumiwa zaidi katika majaribio ya uundaji wa cloning ili kuongeza uaminifu. Taq DNA Polymerase ni polimerasi ya kawaida ya DNA inayotumiwa katika Polymerase Chain Reaction (PCR), na imetengwa kutoka kwa bakteria inayoweza joto; Thermus aquaticus. Tofauti kuu kati ya enzymes mbili ni chanzo cha microorganism. Phusion imetengwa kutoka kwa extremophile, Pyrococcus furiosus ambapo, Taq polymerase imetengwa na thermophile, Thermus aquaticus.
Phusion ni nini?
Phusion DNA polymerase ni polimerasi riwaya ambayo imetengenezwa kwa kutenga kimeng'enya kutoka kwa Pyrococcus furiosus, ambayo ni Archaea kali. Vijidudu hivi hukaa katika hali ya joto la juu sana, na hivyo kufanya polima polimerasi inayoweza kustahimili joto. Phusion polymerase hutumiwa kupata uaminifu uliokithiri juu ya polima ya kawaida ya thermostable; Taq polymerase. Phusion polymerase ina uwezo wa kukuza violezo virefu hadi 7.5kb ya DNA ya jeni. Kiwango bora cha upolimishaji wa polimerasi ya Phusion ni 720 C. Phusion pia hutumika katika uundaji wa bidhaa kwa mpangilio, uchanganuzi wa usemi na uchanganuzi wa mabadiliko.
Phusion DNA polymerase ina shughuli ya 3’ – 5’ ya exonuclease. Hii inaruhusu usahihishaji wa uzi mpya uliosanisishwa baada ya usanisi. Kwa hivyo, kutolingana kwa nyukleotidi hurekebishwa kwa urahisi. Kwa hivyo, ina kiwango cha chini cha makosa. Faida za jumla za Phusion polymerase ni;
- Uaminifu Uliokithiri
- Kasi ya Juu na muda uliopunguzwa wa nyongeza
- Miitikio Imara na inahitaji uboreshaji mdogo
- Mazao ya Juu
Kielelezo 01: Phusion
Hasara kuu ya Phusion polymerase ni kwamba imezuiwa ikiwa na deoxyuridine trifosfati (dUTP). Wakati dUTP zimekusanywa katika mchanganyiko wa majibu, inaweza kuzuia vitendo vya Phusion polymerase. Hii inazuiwa kwa kutibu mchanganyiko wa athari na dUTPase kabla ya kuongeza kimeng'enya. Kwa sasa, lahaja sugu ya dUTP ya polimerasi ya Phusion inayojulikana kama Pfu Turbo inatumika badala ya polimerasi ya Phusion kama suluhisho la tatizo hili.
Taq Polymerase ni nini?
Uvumbuzi wa polimerasi ya Taq DNA umeleta mapinduzi makubwa katika nyanja ya baiolojia ya molekuli. Ilitatua tatizo kubwa katika ukuzaji wa DNA. Taq DNA polymerase ni kimeng'enya cha polimerasi kisicho na joto kilichotolewa na kutengwa kutoka kwa bakteria ya thermophilic, Thermus aquaticus. Ugunduzi wa enzymes hii husababisha maendeleo ya PCR. Kimeng'enya hiki kimeruhusu matumizi ya mmenyuko wa mnyororo wa polimerasi katika ukuzaji wa DNA badala ya mbinu za kawaida za uundaji wa kazi ngumu. PCR sasa inatumika katika uchunguzi wa molekuli, nyanja za kilimo na viwanda na tofauti nyingi mpya zimeongezwa kwa mbinu.
Kielelezo 02: Taq Polymerase
Taq DNA polymerase hutenda kazi katika kiwango bora cha joto kati ya 720C – 800C. Taq DNA polymerase inahitaji sababu ya ushirikiano; magnesiamu kwa kazi yake. Taq polymerase haina uwezo wa kusahihisha wa 3' – 5', kwa hivyo, kiwango cha makosa ya polimerasi ya Taq DNA ni ya juu ikilinganishwa na aina mpya zaidi za polima za DNA kama vile Phusion polymerase n.k. Lakini, umaarufu wa Taq DNA polymerase unabakia kuwa sawa katika ulimwengu wa sayansi kutokana na urahisi na kunyumbulika kwa kimeng'enya.
Ni Nini Zinazofanana Kati ya Phusion na Taq polymerase?
- Enzymes zote za Phusion na Taq polymerase ni vimeng'enya vinavyopolimisha ambavyo vinaweza kuongeza nyukleotidi kwenye ncha ya 3' isiyolipishwa ya uzi wa DNA.
- Polima za Phusion na Taq zinahitaji mfuatano wa awali ili kuanzisha upolimishaji.
- Polima za Phusion na Taq haziwezi kubadilika joto.
- Polima za Phusion na Taq zinatumika katika mifumo ya PCR ili kukuza DNA.
- Wakati wa kuongeza polimerasi kwenye mchanganyiko wa mmenyuko, polimerasi za Phusion na Taq huongezwa mwisho ili kuhakikisha ufanisi wa kimeng'enya.
- Polima za Phusion na Taq zimeundwa kibiashara kwa madhumuni ya majaribio ya baiolojia ya molekuli.
- Polima za Phusion na Taq zinahitaji cofactor ili kukamilisha utendakazi wake.
Nini Tofauti Kati ya Phusion na Taq Polymerase?
Phusion vs Taq Polymerase |
|
| Phusion ni polimerasi ya DNA iliyotengwa kutoka kwa Pyrococcus furiosus na hutumiwa zaidi katika majaribio ya uundaji wa uundaji wa uundaji wa uundaji wa uundaji wa nyuzi ili kuongeza uaminifu. | Taq DNA Polymerase ni polimerasi ya kawaida ya DNA inayotumiwa katika Polymerase Chain Reaction (PCR), na imetengwa kutoka kwa bakteria inayoweza thermostable, Thermus aquaticus. |
| Kiumbe Chanzo | |
| Phusion imetolewa kwenye archaea extremophilic – Pyrococcus furiosus. | Kazi hizi za fasihi zimeanzia kipindi cha ukoloni hadi kipindi cha ukoloni. |
| Uwezo wa kusoma kwa uthibitisho | |
| 3’ – 5’ uwezo wa kusoma uthibitisho upo katika Phusion. | 3’ – 5’ uwezo wa kusoma uthibitisho haupo katika Taq polymerase. |
| Uaminifu | |
| Uaminifu wa hali ya juu upo pamoja na Phusion. | Taq polymerase inaonyesha uaminifu wa chini. |
| Kukuza | |
| Phusion ina uwezo wa kukuza vipande virefu vya DNA. | Taq polymerase ina uwezo wa kukuza vipande vifupi vya DNA. |
| dUTP Sumu | |
| Kitendo cha phusion kimezuiwa na mkusanyo usio wa kawaida. | Taq polimasi haizuiliwi na dUPT. |
Muhtasari – Phusion vs Taq polymerase
Phusion na Taq DNA polimasi ni polima mbili zisizo na joto ambazo hutumika katika mbinu za PCR. Phusion ni polimerasi iliyotengwa na extremophile, Pyrococcus furiosus ilhali, Taq imetengwa na bakteria wanaoweza thermostable Thermus aquaticus. Ugunduzi wa polimerasi ya Taq DNA husababisha uvumbuzi wa PCR. Phusion ina faida nyingi juu ya Taq ambayo imefanya Phusion chaguo bora katika kutoa DNA ya uaminifu wa juu. Hata hivyo, Taq polymerase bado inatumika kama kimeng'enya cha kawaida cha polimerasi katika PCR. Hii ndio tofauti kati ya Phusion na Taq polymerase.
