Tofauti Muhimu – CFU dhidi ya MPN
Kitengo cha kuunda koloni (CFU) na Nambari inayowezekana zaidi (MPN) ni mbinu mbili zinazotumiwa kuhesabu vijiumbe katika sampuli. Vigezo vyote viwili hutumika kutambua ubora wa maji na bakteria ya kiashiria cha kinyesi katika sampuli za maji. Kitengo cha kuunda koloni ni kipimo kinachotumiwa kuhesabu idadi ya seli za bakteria au seli za kuvu katika ujazo maalum au uzito wa sampuli fulani. Kipimo cha kawaida cha kigezo hiki ni CFU/ml au CFU/g. Nambari inayowezekana zaidi ni kitengo kingine kinachotumiwa kupima idadi ya seli za bakteria zinazoweza kutumika katika sampuli ya kioevu. Tofauti kuu kati ya CFU na MPN ni kwamba CFU inakokotolewa kutoka kwa koloni za bakteria na fangasi zinazokua kwenye bamba gumu la agar huku MPN ikikokotwa kutoka kwa bakteria wanaoweza kukua katika hali ya kioevu.
CFU ni nini?
Kitengo cha kutengeneza koloni (CFU) ni kigezo ambacho hupima idadi ya seli zinazoweza kufaidika za bakteria au fangasi katika sampuli fulani. Njia ya kuhesabu vitengo vya kuunda koloni inajulikana kama hesabu ya kawaida ya sahani. Makoloni yanayowezekana ambayo yanaonekana kwenye bati za agar huonyeshwa kama CFU kwa kila ml 1 (kipimo cha kutengeneza koloni kwa mililita) ya sampuli ya vimiminiko au CFU kwa g 1 (kipimo cha kuunda koloni kwa gramu moja) ya sampuli ya yabisi.
Kuna mbinu mbili za kawaida zinazotumiwa kupima CFU katika sampuli. Wao ni njia ya sahani iliyoenea na njia ya kumwaga sahani. Njia hizi mbili zinaungwa mkono na mbinu inayoitwa dilution ya serial. Sampuli zilizopunguzwa kiserikali huwezesha kupata idadi inayoweza kuhesabika ya makoloni kwenye uso wa agar. Kiasi kinachojulikana cha sampuli kinaweza kuenea kwenye uso wa sahani ya agar, au kuchanganywa na agar na kumwaga kwenye sahani. Kisha sahani inaingizwa na makoloni yanayotokea yanahesabiwa. Idadi ya makoloni inahusiana na idadi ya vijidudu ndani ya sampuli asili. Sahani zinazoonyesha koloni nyingi au koloni chache sana hazijumuishwi kuhesabiwa kwa sababu huenda matokeo yasiwe sahihi kitakwimu kwenye bati hizo. Kulingana na takwimu, safu bora zaidi ni makoloni 30 - 300 kwenye sahani ya agar. Kwa hivyo, sahani sahihi zinapaswa kuchaguliwa kwa hesabu sahihi. Mchanganuo wa mfululizo unafanywa kwa chaguo la kukokotoa lililo hapo juu.
Baada ya kuhesabu idadi ya koloni zinazoweza kutumika kwenye sahani, CFU/ml inaweza kuhesabiwa kwa kutumia mlinganyo ufuatao.
CFU kwa kila ml ya sampuli halisi=idadi ya makoloni kwenye sahani X kiashiria cha dilution
Dilution factor=(1/ Dilution ya sahani)
Kwa mfano, ukipata koloni 149 kwenye sahani ya dilution ya 10-4, basi idadi ya bakteria katika 1 ml ya sampuli asili inaweza kuhesabiwa kama ifuatavyo.:
CFU/ml=(149) x (1/10-4)
=149 × 104 au 1490000
=1. 49 x 106
Kielelezo 01: Kitengo cha Kuunda Ukoloni
MPN ni nini?
Nambari inayowezekana zaidi ni kipimo mbadala cha CFU/ml. MPN pia hukadiria seli zinazoweza kutumika katika sampuli ya kioevu. Inahesabu viumbe vinavyokua katika utamaduni wa kioevu na ni mbinu ya bakteria. Njia hii ni muhimu sana kwa sampuli ambazo zina viwango vya chini vya seli za bakteria; kwa mfano, maziwa, maji ya kunywa nk. Thamani ya MPN inaonyeshwa kwa 100 ml ya kiasi. MPN inategemea mbinu ya takwimu kulingana na nadharia ya uwezekano. Kuna majedwali ya takwimu yaliyoundwa ili kupata thamani za MPN kwa kila ml 100 ya sampuli. Majedwali haya yanaonyesha matokeo katika viwango vya kutegemewa vya 95%.
Thamani ya MPN huhesabiwa baada ya kutekeleza mbinu inayoitwa njia ya uchachushaji wa mirija mingi. Seti tatu za mirija iliyo na nyenzo inayofaa ya kitamaduni huchanjwa kwa ujazo tatu tofauti wa sampuli kama vile 10 ml, 1 ml na 0.1 ml na incubated kwa ukuaji. Baada ya kipindi cha incubation, zilizopo hupigwa alama + (chanya) au - (hasi) kwa uwepo au kutokuwepo kwa ukuaji. Mchoro wa matokeo chanya na hasi basi hulinganishwa na jedwali la MPN la uwezekano wa takwimu ili kukadiria idadi ya vijidudu. Kisha thamani ya MPN inatolewa kwa 100 ml ya sampuli. MPN hutumiwa sana kugundua bakteria ya coliform iliyopo kwenye sampuli za maji.
Kielelezo 02: Jedwali la MPN
Kuna tofauti gani kati ya CFU na MPN?
CFU dhidi ya MPN |
|
| CFU ni kipimo kinachotumiwa kueleza idadi ya makundi ya bakteria au kuvu katika sampuli fulani. | MPN ni kipimo mbadala cha CFU na hupima idadi ya seli za bakteria zinazoweza kutumika katika sampuli ya kioevu. |
| Kitengo | |
| CFU/ml au CFU/g | MPN/100 ml |
| Hesabu | |
| CFU hukokotolewa kwa kuhesabu idadi ya koloni zinazokuzwa kwenye sahani za agar. | MPN inakokotolewa kwa kulinganisha mifumo chanya na hasi ya mirija na jedwali la takwimu la MPN. |
| Mbinu ya Kupunguza Mfululizo | |
| Uyeyushaji wa mfululizo hufanywa kabla ya kuweka sampuli kwenye sahani za agar. | Uyeyushaji wa mfululizo haufanyiki kwa kawaida wakati MPN inakokotolewa |
| Mbinu | |
| Mbinu ya sahani na njia ya kumwaga sahani ni aina mbili za mbinu hudumu ili kupata CFU. | Uchachushaji wa mirija mingi ndiyo njia inayotumika kupata thamani ya MPN. |
Muhtasari – CFU dhidi ya MPN
Kupima ukuaji wa vijidudu inahitajika kwa sababu nyingi. Katika mimea ya usindikaji wa chakula, ni muhimu kupima kiwango na aina ya microorganisms katika chakula. Katika tasnia ya chakula na dawa, ni muhimu kuhakikisha kuwa matibabu ya sterilization yanatumika kwa ufanisi. Katika mimea ya matibabu ya maji taka, inahitajika kuchukua hesabu ya microbial mara kwa mara. Wakati wa kuongeza utaratibu katika biolojia ya molekuli, inahitajika kupima idadi ya makoloni kwenye sahani. Kwa hivyo, kuna njia tofauti za kuhesabu na kupima ukuaji zinazopatikana. CFU na MPN ni njia mbili kama hizo zinazopitishwa sana katika nyanja mbalimbali. CFU ni kipimo cha idadi ya koloni zinazoweza kuepukika za bakteria na fangasi zilizopo kwenye sampuli fulani. Inakokotolewa kwa kutumia njia ya kawaida ya kuhesabu sahani au njia inayowezekana ya kuhesabu sahani. MPN ni kipimo kingine kinachoonyesha idadi ya seli za bakteria zilizopo katika ujazo fulani wa sampuli ya kioevu. Inakokotolewa kwa kutumia njia ya kuchachusha mirija mingi na jedwali la MPN. Hii ndio tofauti kati ya CFU na MPN.
Pakua Toleo la PDF la CFU dhidi ya MPN
Unaweza kupakua toleo la PDF la makala haya na uitumie kwa madhumuni ya nje ya mtandao kulingana na madokezo ya manukuu. Tafadhali pakua toleo la PDF hapa Tofauti Kati ya CFU na MPN.
