Tofauti Muhimu – Direct vs Indirect ELISA
Kipimo cha kingamwili kilichounganishwa na kimeng'enya (ELISA), pia kinajulikana kama immunoassay ya kimeng'enya, ni kipimo cha seroloji ambacho hutambua kingamwili katika damu. Inatumika kama zana ya uchunguzi ili kujua ikiwa mgonjwa ameathiriwa na aina fulani ya virusi au wakala mwingine wa kuambukiza (antijeni) na ikiwa mwili umetoa kingamwili dhidi ya maambukizi. ELISA pia inaweza kutambua maambukizi ya zamani na ya sasa. Kwa hivyo, ELISA hutumiwa mara nyingi kama kipimo cha uchunguzi na madaktari kabla ya uchambuzi wa kina wa magonjwa. Kipimo hiki kinaweza kufanywa katika maabara kwa kuchukua sampuli ya damu kutoka kwa mgonjwa. Kuna aina mbili za mtihani wa ELISA: ELISA moja kwa moja na ELISA isiyo ya moja kwa moja. Tofauti kuu kati ya ELISA ya moja kwa moja na isiyo ya moja kwa moja ni kwamba ELISA isiyo ya moja kwa moja ni nyeti zaidi na inahitaji kuongezwa kwa kingamwili ya pili huku ELISA ya moja kwa moja ikiwa ni nyeti kidogo na hutumia kingamwili msingi pekee.
Direct ELISA ni nini?
ELISA ni uchunguzi wa uchunguzi wa ugonjwa unaofanywa ili kubaini uwepo wa antijeni au kingamwili fulani kwenye damu. Inafanywa kama mtihani wa sahani. Inatumia kingamwili zilizounganishwa na vimeng'enya vilivyojaribiwa kwa urahisi. Uwepo wa antijeni katika sampuli ya seramu hufungana na kingamwili maalum zinazohusishwa na vimeng'enya. Katika hatua ya mwisho, substrate maalum huongezwa ili kuguswa na enzyme. Kimeng'enya hubadilisha sehemu ndogo kuwa bidhaa ya rangi au inayotoa mawimbi. Mabadiliko ya rangi katika sehemu ndogo ya kemikali huonyesha kuwepo kwa kingamwili fulani katika sampuli ya seramu. Mtihani wa ELISA wa moja kwa moja hutumia kingamwili ya msingi tu iliyounganishwa na kimeng'enya. Baada ya kumfunga antijeni, hubadilisha rangi haraka, ikionyesha uwepo wa wakala wa kuambukiza katika damu. Hata hivyo, ukubwa wa mawimbi ni dhaifu katika ELISA ya moja kwa moja kwani epitopes ni mdogo kwa kufunga antijeni. Kwa hivyo, ELISA ya moja kwa moja ni nyeti kidogo ikilinganishwa na ELISA isiyo ya moja kwa moja.
Kielelezo 01: Jaribio la ELISA la Moja kwa Moja
Indirect ELISA ni nini?
ELISA inaweza kufanywa kwa kutumia aina mbili za kingamwili ambazo ni; kingamwili ya msingi na kingamwili ya pili. Zana ya ELISA isiyo ya moja kwa moja hutumia aina zote mbili za kingamwili ili kukuza mawimbi kwa utambuzi bora. Mbinu isiyo ya moja kwa moja ya ELISA inatekelezwa kama ifuatavyo.
- Sahani huwekwa kingamwili na huoshwa ili kuzuia ufungaji usio maalum.
- Kisha kingamwili msingi huongezwa na kuoshwa.
- Kingamwili ya pili iliyounganishwa na kimeng'enya huongezwa na kuosha.
- Njia ndogo huongezwa na kuruhusiwa kuathiriwa na vimeng'enya.
- Ishara zimetambuliwa, na kuwepo au kutokuwepo kwa antijeni mahususi kwenye sampuli kunatambuliwa.
Katika jaribio lisilo la moja kwa moja la ELISA, kingamwili kadhaa za pili zinaweza kushikamana na kingamwili moja ya msingi. Kingamwili za sekondari zimeunganishwa na vimeng'enya vilivyojaribiwa kwa urahisi. Kwa hiyo, kufunga moja kunaweza kutoa ishara kali kutokana na mwingiliano zaidi ya moja. Kwa hivyo, ELISA isiyo ya moja kwa moja ni nyeti zaidi kuliko ELISA ya moja kwa moja. Hata hivyo, ELISA isiyo ya moja kwa moja inaweza kutoa mawimbi yasiyo mahususi kutokana na miitikio tofauti ya kingamwili za pili.
Kielelezo 02: Mtihani wa ELISA usio wa moja kwa moja
Kuna tofauti gani kati ya ELISA Direct na Indirect?
Moja kwa moja dhidi ya ELISA isiyo ya moja kwa moja |
|
| ELISA ya moja kwa moja si nyeti sana ikilinganishwa na ELISA isiyo ya moja kwa moja. | Indirect ELISA ni nyeti zaidi. |
| Muda Umetumika | |
| Jaribio la ELISA la moja kwa moja ni mchakato wa haraka. | Indirect ELISA ni muda mwingi. |
| Matumizi ya Kingamwili | |
| Aina moja tu ya kingamwili (Kingamwili za Msingi) hutumika katika ELISA ya moja kwa moja. | Kingamwili za msingi na za pili hutumika kwa ELISA isiyo ya moja kwa moja. |
| Unganisha na Vimeng'enya | |
| Kingamwili msingi huunganishwa na vimeng'enya. | Kingamwili za pili zimeunganishwa na vimeng'enya. |
| Utendaji Mtambuka wa Kingamwili za Pili | |
| Direct ELISA huondoa utendakazi mtambuka wa kingamwili za pili. | ELISA isiyo ya moja kwa moja inaathiriwa na utendakazi mtambuka wa kingamwili za pili. |
| Ishara | |
| Ishara ni dhaifu ikilinganishwa na ELISA isiyo ya moja kwa moja. | Ishara zimekuzwa katika ELISA isiyo ya moja kwa moja. Kwa hivyo, ni rahisi kugundua. |
Muhtasari – Direct vs Indirect ELISA
ELISA ni mbinu ya kibayolojia inayotumiwa hasa katika elimu ya kinga ya mwili kutambua kuwepo kwa kingamwili au antijeni katika sampuli ya damu ya mgonjwa. Inaweza kufanywa kupitia michakato miwili inayojulikana kama ELISA ya moja kwa moja au isiyo ya moja kwa moja. Kipimo cha moja kwa moja cha ELISA hutumia kingamwili za msingi pekee kugundua antijeni huku ELISA isiyo ya moja kwa moja inatumia kingamwili za msingi na za upili. Katika ELISA ya moja kwa moja, kingamwili za msingi huwekwa lebo ilhali katika njia zisizo za moja kwa moja kingamwili za upili za ELISA zina lebo. Hii ndio tofauti kati ya ELISA ya moja kwa moja na isiyo ya moja kwa moja.
