Tofauti kuu kati ya kipande cha Klenow na DNA polymerase 1 ni kwamba kipande cha Klenow ni sehemu kubwa ya DNA polymerase 1 ambayo haina shughuli ya exonuclease 5′ hadi 3′ huku DNA polymerase ni kimeng'enya cha E. coli ambacho kina zote tatu. vikoa ikijumuisha 5′ hadi 3′ shughuli ya exonuclease.
DNA polymerase ni mojawapo ya vimeng'enya muhimu vinavyohusika katika uigaji wa DNA katika viumbe hai. Kuna aina tofauti za kimeng'enya cha DNA polymerase inayopatikana katika yukariyoti na prokariyoti kulingana na saizi na umbo. DNA polymerase 1, 2 na 3 hupatikana tu katika viumbe vya prokaryotic, na hucheza majukumu tofauti katika uigaji wa DNA. DNA polymerase 1 ina vikoa vitatu vilivyo na 5' hadi 3' polimasi, 3' hadi 5' shughuli ya exonuclease na 5' hadi 3' shughuli ya exonuclease. Klenow fragment ni bidhaa ya proteolytic ya DNA polymerase 1. Ina 5 hadi 3′ polymerase na 3′ hadi 5′ shughuli za exonuclease ya DNA polymerase 1 isiyoharibika, lakini haina shughuli ya 5′ hadi 3′ ya exonuclease.
Klenow Fragment ni nini?
Kipande cha Klenow ni sehemu kubwa ya DNA polimasi 1. Tofauti na DNA polimasi 1, 5′ hadi 3′ shughuli ya exonuclease haionekani kwenye kipande cha Klenow kwa kuwa haina kikoa cha 5′ hadi 3′ cha exonuclease ya mbele. Vipande vya Klenow hutokezwa kwa kusaga DNA polymerase 1 na protease inayoitwa subtilisin, ambayo ni kimeng'enya cha kusaga protini. Katika baadhi ya programu, shughuli ya 3′ hadi 5′ ya exonuclease ya kipande cha Klenow inakuwa isiyofaa. Inaweza kuondolewa kwa kuanzisha mabadiliko katika jeni ambayo husimba kipande cha Klenow. Kimeng'enya kinachotokea ambacho kina shughuli ya polimerasi ya 5' hadi 3 tu kinajulikana kama kipande cha exo-Klenow. Kimofolojia, kipande cha Klenow kinafanana na mkono wa kulia wa binadamu. Ina N-terminal 3′-5′ exonuclease domain na C-terminal polymerase domain ikitenganishwa na takriban 30 A.
Kielelezo 01: Kipande cha Klenow na DNA Polymerase 1
Kipande cha Klenow ni zana muhimu katika mbinu za kibiolojia ya molekuli. Vipande vya Klenow vina matumizi mengi. Ni muhimu sana katika uundaji wa mwisho butu ili kutoa vipande butu. Vipande vya Klenow vinaweza kuondoa 3′ overhangs au kujaza overhangs 5′ ili kuunda ncha butu. Zaidi ya hayo, vipande vya Klenow hutumika kuunganisha DNA yenye nyuzi mbili kutoka kwenye nyuzi moja. Zaidi ya hayo, hutumika kutayarisha uchunguzi wenye lebo ya mionzi kwa kutumia shughuli ya DNA polymerase inayotegemea DNA ya 5'hadi 3′.
DNA Polymerase 1 ni nini?
DNA polymerase 1 (Pol 1) ni kimeng'enya kinachopatikana katika prokariyoti ambacho kinahitajika kwa ajili ya urudufishaji wa DNA ya bakteria. Ni aina ya kwanza ya DNA polimasi iliyogunduliwa na Arthur Kornberg mwaka wa 1956. Pol 1 ndiyo polimasi iliyo nyingi zaidi katika E. koli. Imesimbwa na pola ya jeni na inajumuisha asidi ya amino 928. Inajumuisha vikoa vitatu. Vikoa vyote vitatu hutimiza utendakazi tofauti. Vikoa viwili hufanya shughuli ya 5′ hadi 3′ exonuclease na 3′ hadi 5′ shughuli ya exonuclease. Kwa sababu ya shughuli hii inayomilikiwa na Pol 1, ni maarufu kama kimeng'enya cha kurekebisha DNA badala ya kimeng'enya cha kunakili DNA. Kikoa cha tatu kina uwezo wa kuchochea upolimishaji nyingi (5′ hadi 3′) kabla ya kutolewa kwa kiolezo cha DNA na kuunganisha vipande vya Okazaki pamoja kwa kujaza DNA mpya na kuondoa vianzio vya RNA.
Kielelezo 02: DNA Polymerase
Pol 1 iliyotengwa na E Coli ilitumiwa sana katika matumizi ya molekuli. Hata hivyo, mara tu Taq Polymerase ilipogunduliwa, ilichukua nafasi ya E Coli Pol 1 katika teknolojia ya PCR. Taq polymerase ni aina ya DNA polimasi inayoweza joto ambayo ni ya Pol 1.
Je, Kuna Ufanano Gani Kati ya Klenow Fragment na DNA Polymerase 1?
- Kipande cha Klenow ni sehemu kubwa ya DNA polimasi 1.
- Zina shughuli ya 5’hadi 3′ inayotegemea DNA polimasi ya DNA na shughuli ya 3’hadi 5′ ya exonuclease ambayo hupatanisha usahihishaji.
- Zinatumika kwa madhumuni mengi.
Kuna tofauti gani kati ya Klenow Fragment na DNA Polymerase 1?
Tofauti kuu kati ya kipande cha Klenow na DNA polimasi 1 ni kwamba kipande cha Klenow hakina shughuli ya exonuclease ilhali DNA polimasi 1 ina shughuli ya 5′ hadi 3′ ya exonuclease. Kwa hivyo, kipande cha Klenow kina vikoa viwili, huku DNA polimasi 1 ina vikoa vyote vitatu.
Hapo chini ya infographic inaonyesha maelezo zaidi ya tofauti kati ya kipande cha Klenow na DNA polymerase 1.
Muhtasari – Klenow Fragment dhidi ya DNA Polymerase 1
DNA polimasi 1 ni kimeng'enya cha E. koli ambacho kina vikoa vitatu kama kikoa cha 5′ hadi 3′ cha upolimishaji, 3′ hadi 5′ kikoa cha exonuclease na 5′ hadi 3′ kikoa cha exonuclease. Klenow fragment ni sehemu kubwa ya DNA polymerase. Haina kikoa kimoja cha DNA polymerase 1, ambayo ni 5′ hadi 3′ exonuclease domain. Tofauti kuu kati ya kipande cha Klenow na DNA polymerase 1 ni kwamba vipande vya Klenow havina kikoa cha 5′ hadi 3′ exonuclease huku DNA polymerase 1 ina 5′ hadi 3′ exonuclease domain.
