Tofauti kuu kati ya ELISA ya ushindani na isiyo na ushindani ni kwamba ELISA ya ushindani hutumia antijeni ya kuzuia wakati ELISA isiyo na ushindani haitumii antijeni ya kuzuia kufanya majaribio.
Kipimo cha Immunosorbent Iliyounganishwa na Enzyme (ELISA) ni uchanganuzi wa kinga ya mwili ambao hutambua malengo mbalimbali kama vile kingamwili, antijeni, protini na glycoproteini. Ni njia ya haraka na rahisi ya kufanya. Kwa hivyo, hutumiwa mara nyingi kwa madhumuni ya utafiti na utambuzi. ELISA inahusisha matumizi ya vimeng'enya na kumfunga maalum kwa kingamwili na antijeni. Kulingana na jinsi athari hutokea, kuna aina nne za ELISA: ELISA moja kwa moja, ELISA isiyo ya moja kwa moja, sandwich ELISA, na kizuizi cha ELISA. Moja kwa moja, isiyo ya moja kwa moja na sandwich ELISA ni aina za ELISA isiyo na ushindani wakati kizuizi cha ELISA ni aina ya ELISA kamili. Lengo kuu la makala haya ni kujadili tofauti kati ya ELISA ya ushindani na isiyo ya ushindani.
ELISA ya Ushindani ni nini?
ELISA yenye ushindani hupima ukolezi wa antijeni katika sampuli kupitia ugunduzi wa mwingiliano wa mawimbi. Hapa, kipimo kinatumia antijeni ya kuzuia. Kwa hivyo, ni aina ya kizuizi cha ELISA. Wakati wa utaratibu huu, antijeni zilizopo kwenye sampuli hushindana na antijeni ya marejeleo iliyochaguliwa ili kuunganisha kwa kiwango mahususi cha kingamwili iliyo na lebo. Zaidi ya hayo, utaratibu huu huanza na incubation ya sampuli, na ziada ya kiasi cha kinachoitwa kingamwili. Pia, antijeni ya marejeleo inapaswa kupakwa awali kwenye sahani nyingi za kupima vizuri. Kisha mchanganyiko wa sampuli unapaswa kuongezwa kwenye sahani ya kupima ambayo ina antijeni ya kumbukumbu. Kingamwili zisizolipishwa zitajifunga kwa antijeni ya marejeleo kulingana na kiasi cha antijeni kwenye sampuli. Kwa hivyo, ikiwa sampuli zaidi ya antijeni iko, antijeni ndogo ya marejeleo itagunduliwa. Kwa hivyo, hutengeneza mawimbi dhaifu zaidi.
Kielelezo 01: ELISA
Kinyume chake, sampuli inapokuwa na kiasi kidogo cha antijeni, antijeni nyingi zaidi ya marejeleo itachukua kingamwili na kutoa ishara kali. Kwa kuwa ELISA ya ushindani hutoa ishara yenye nguvu zaidi sampuli inapokuwa na kiasi kidogo cha antijeni, ELISA ya ushindani ni kipimo nyeti sana, hata kwa sampuli zilizo na idadi ndogo ya antijeni.
Katika baadhi ya vifaa vya ELISA vya ushindani, antijeni iliyo na lebo hutumiwa badala ya kingamwili iliyo na lebo. Hapa, antijeni iliyo na lebo na sampuli ya antijeni zitashindana kwa kufunga kingamwili msingi. Vile vile, wakati kiasi cha antijeni katika sampuli ni kidogo, kiasi cha antijeni kilicho na lebo ambacho hufunga kwenye kingamwili kitakuwa cha juu zaidi na kuunda mawimbi yenye nguvu zaidi.
ELISA Isiyo na ushindani ni nini?
Kati ya aina nne za ELISA, aina tatu ni ELISA isiyo na ushindani. Ni ELISA ya moja kwa moja, ELISA isiyo ya moja kwa moja, na sandwich ELISA. Miundo yote mitatu hufanya kazi chini ya kanuni ya kawaida ya ELISA yenye tofauti kidogo katika mbinu zao.
Direct ELISA hutumia kimeng'enya kinachoitwa kingamwili msingi. Kwa hivyo, hauitaji antibody ya sekondari. Kwa hiyo, ELISA moja kwa moja ni kasi zaidi kuliko aina nyingine za ELISA. Kingamwili cha msingi kitafunga moja kwa moja kwa antijeni lengwa isiyohamishika ambayo iko kwenye sahani. Kwa hivyo, mmenyuko wa enzyme-substrate utafanyika, na kutoa ishara inayoonekana.
Kielelezo 02: Sandwichi ELISA
Tofauti na ELISA ya moja kwa moja, ELISA isiyo ya moja kwa moja hutumia kingamwili msingi isiyo na lebo na kimeng'enya kinachoitwa kingamwili ya pili. Pindi kingamwili ya msingi inapojifunga kwa antijeni isiyohamishika, kingamwili ya pili hujifunga kwenye kingamwili ya msingi. Kimeng'enya katika kingamwili ya pili kitaitikia na antijeni na kutoa ishara inayoonekana. Sandwichi ELISA ni tofauti na ELISA ya moja kwa moja na isiyo ya moja kwa moja. Hapa, kingamwili haijasogezwa kwenye ukuta wa bati la majaribio.
Je, Kuna Ufanano Gani Kati ya ELISA ya Ushindani na Isiyo na Ushindani?
- ELISA yenye ushindani na isiyo na ushindani ni aina mbili za mbinu za upimaji wa immunosorbent.
- Ni mbinu zinazonyumbulika sana na nyeti.
- Zaidi ya hayo, ELISA yenye ushindani na isiyo na ushindani ni vipimo vya kinga vinavyounganishwa na vimeng'enya.
- Pia, mbinu zote mbili hutoa mawimbi kutokana na mmenyuko wa kimeng'enya-substrate.
Kuna tofauti gani kati ya ELISA Mwenye Ushindani na Asiye na Ushindani?
ELISA ya Ushindani ni aina ya ELISA ambayo inategemea kukamilishwa kati ya antijeni ya uchanganuzi na antijeni inayoitwa kwa kiwango kidogo cha kingamwili mahususi. Kwa upande mwingine, hakuna ushindani kama huo uliopo kati ya antijeni ya riba na antijeni ya kumbukumbu katika ELISA isiyo na ushindani. Kwa hivyo, hii ndiyo tofauti kuu kati ya ELISA ya ushindani na isiyo na ushindani. Vile vile, ELISA ya ushindani ni kizuizi cha ELISA ilhali ELISA isiyo na ushindani sio kizuizi cha ELISA. Kwa hivyo, hii pia ni tofauti kati ya ELISA ya ushindani na isiyo ya ushindani.
Aidha, ELISA ya ushindani inafaa zaidi kupima kiwango cha chini cha antijeni inayokuvutia. Ni mbinu nyeti. Kwa upande mwingine, ELISA isiyo na ushindani haitegemei idadi ya antijeni zilizopo kwenye sampuli. Kwa hivyo, hii pia ni tofauti kati ya ELISA ya ushindani na isiyo ya ushindani.
Hapo chini infographic inaeleza tofauti kati ya ELISA shindani na isiyo ya ushindani.
Muhtasari – Ushindani dhidi ya ELISA Isiyo na Ushindani
ELISA yenye ushindani na isiyo na ushindani ni aina mbili kuu za ELISA au vipimo vya kinga vinavyounganishwa na vimeng'enya. Katika muhtasari wa tofauti kati ya ELISA shindani na isiyo na ushindani, ELISA shindani hutegemea ushindani kati ya antijeni ya riba na antijeni ya marejeleo kuelekea kiwango kidogo cha kingamwili. Kwa hivyo, ELISA ya ushindani pia inaitwa ELISA ya kizuizi. Kwa upande mwingine, ELISA isiyo na ushindani haitegemei ushindani kati ya antijeni lengwa na antijeni za kumbukumbu. Inatumia ziada ya kingamwili maalum iliyo na lebo kuelekea uchanganuzi wa maslahi. Kwa hivyo, hii ndiyo tofauti kuu kati ya ELISA ya ushindani na isiyo na ushindani. ELISA ya moja kwa moja, ELISA isiyo ya moja kwa moja, na sandwich ELISA ni aina tatu kuu za ELISA isiyo na ushindani.