Tofauti Muhimu – Capillary Electrophoresis vs Gel Electrophoresis
Electrophoresis ni mbinu ambayo hutumiwa kutenganisha biomolecules kulingana na chaji ya chembe, ukubwa wa chembe na umbo la chembe. Uhamaji wa molekuli, unaojulikana kama uhamaji wa kielektroniki, unategemea aina ya polima/gel inayotumika, saizi yake ya pore, voltage inayotolewa, muda wa kukimbia na uwiano wa uso na ujazo. Kuna aina tofauti za mbinu za electrophoresis kulingana na aina ya biomolecule inayotumiwa. Aina ya kwanza ya electrophoresis iliyovumbuliwa ilikuwa electrophoresis ya karatasi ambapo karatasi ya nitrocellulose ilitumiwa kama njia ya kutenganisha biomolecules. Kanuni ya electrophoresis ya gel ambapo gel tofauti za ukubwa wa pore zilitumiwa kutenganisha biomolecules, ilivumbuliwa baadaye. Mbinu ya electrophoresis ya gel ilibadilishwa zaidi ili kuboresha usahihi wa mbinu, na moja ya marekebisho hayo ni electrophoresis ya capillary. Tofauti kuu kati ya electrophoresis ya capilari na electrophoresis ya gel ni kwamba electrophoresis ya gel hufanywa kwa ndege ya wima au ya usawa kwa kutumia gel ya polima ya ukubwa wa kawaida wa pore ambapo electrophoresis ya capilari inafanywa katika tube ya capilari na kioevu cha polima au gel..
Gel Electrophoresis ni nini?
Gel electrophoresis ni mbinu inayotumiwa kutenganisha hasa asidi nukleiki, protini au amino asidi kulingana na chaji, ukubwa na umbo lake. Mbinu hii hutumia gel halisi, ambayo ni dutu ya polima, kama njia ya kutenganisha. Geli zinazotumika sana ni Agarose (kwa kutenganisha asidi nucleic) na Polyacrylamide (kwa kutenganisha protini). Kifaa cha gel electrophoretic kina tray ya kutupa gel ili kuandaa gel, akitoa masega kuandaa visima, tank buffer, electrodes - chanya (anode) na hasi (cathode) na kitengo cha usambazaji wa voltage. Molekuli kama vile DNA au RNA, ambazo zina chaji hasi, husogea kutoka kwenye kathodi hadi kwenye anodi na molekuli ambazo zina chaji chaji husogea kinyume chake. Maandalizi ya gel hufanyika kulingana na mahitaji. Ikiwa azimio la juu au mgawanyiko wa molekuli inahitajika, gel ya mkusanyiko wa juu yenye ukubwa mdogo wa pore inapaswa kutayarishwa. Molekuli zilizotengwa kwenye tumbo la gel huzingatiwa baada ya mbinu ya kuchafua. Molekuli zilizotenganishwa huonekana kama mikanda kwenye tumbo la jeli.
Kielelezo 01: Gel Electrophoresis
Elektrophoresis ya gel hutumiwa katika uchunguzi wa molekuli kama vile alama ya vidole vya DNA ili kubaini kuwepo kwa kipande fulani cha DNA/RNA au protini. Gel electrophoresis pia huamua usafi wa sampuli ya biomolecule iliyotolewa. Electrophoresis ya gel hutekelezwa kama hatua ya awali ya kuingia na kuchanganywa na kama uchanganuzi wa uthibitisho baada ya mpangilio.
Capillary Electrophoresis ni nini?
Elektrophoresis ya kapilari ni marekebisho ya elektrophoresis ya gel ambayo hutumia kanuni sawa ya utengano kulingana na chaji, ukubwa wa molekuli, lakini hufanywa katika mirija ya kapilari yenye dutu ya gel au polima kioevu. Kapilari hutayarishwa kwa silika iliyounganishwa, na kila mrija wa kapilari una kipenyo cha ndani cha 50-100μm na urefu wa 25-100cm. Sampuli hudungwa kwenye bomba la kapilari iliyo na nyenzo za polima na hutenganishwa haraka sana kuliko electrophoresis ya gel ya kawaida. Mfumo wa capillary umelindwa vizuri ndani ya koti ya insulator ambayo inalinda sampuli kutokana na uchafuzi wowote. Kapilari zinaweza kujazwa na polima za kioevu kama vile selulosi ya hydroxyethyl au geli zenye msongamano wa juu kama vile Polyacrylamide. Electrophoresis ya capillary hutoa azimio kubwa zaidi; kwa hivyo utengano ni sahihi zaidi. Electrophoresis ya capillary hutumia mfumo wa detector otomatiki kupitia uchambuzi wa spectrophotometric. Hii inatokana na uwiano wa juu wa eneo na ujazo.
Kielelezo 02: Capillary Electrophoresis
Elektrophoresis ya kapilari hutumika katika hali kama vile uchunguzi wa kitaalamu ambapo usahihi wa hali ya juu unahitajika na hautumiwi sana kwani ni mbinu ya gharama kubwa.
Je, Kuna Ufanano Gani Kati ya Capillary Electrophoresis na Gel Electrophoresis?
- Mtengano wa molekuli katika mbinu zote mbili unatokana na chaji na ukubwa wa molekuli.
- Mbinu zote mbili zinaweza kutumika kutenganisha asidi nucleiki na protini.
- Sampuli ya ujazo wa mbinu zote mbili ni sawa.
- Mbinu zote mbili hutumia bafa kuwezesha utengano.
Kuna tofauti gani kati ya Capillary Electrophoresis na Gel Electrophoresis?
Capillary Electrophoresis vs Gel Electrophoresis |
|
| Elektrophoresis ya kapilari ni mbinu inayotenganisha biomolecules kwenye mirija ya kapilari kwa kutumia kimiminika au jeli polima. | Elektrophoresis ya gel ni mbinu inayotenganisha biomolecules kwenye ndege wima au mlalo kwa kutumia polimeri ya gel. |
| Kutengana | |
| Katika electrophoresis ya kapilari, utengano hufanywa ndani ya mrija wa kapilari. | Katika electrophoresis ya gel, utenganisho hufanywa kwa ndege wima au mlalo. |
| Wastani wa Kutengana | |
| polima kioevu kama vile hydroxyethylcellulose hutumika katika kapilari electrophoresis. | Geli, ama agarose au polyacrylamide, hutumika kama njia ya kutengeneza gel electrophoresis. |
| Muunganisho Mtambuka | |
| Ubora wa juu unaweza kupatikana kutokana na kapilari electrophoresis. | Azimio liko chini katika gel electrophoresis. |
| Uwiano wa Eneo la uso kwa Wingi | |
| Uwiano wa uso na ujazo ni wa juu katika kapilari electrophoresis. | Uwiano wa uso kwa uso ni mdogo katika gel electrophoresis. |
| Mbinu ya Kugundua | |
| Ugunduzi hufanywa kupitia vigunduzi otomatiki vya spectrophotometric katika kapilari electrophoresis. | Kuweka rangi na kutazama kupitia kipenyo cha mwanga cha UV hufanywa kama mbinu za kutambua katika gel electrophoresis. |
Muhtasari – Capillary Electrophoresis vs Gel Electrophoresis
Uchunguzi wa molekuli una jukumu kubwa katika ulimwengu wa kisayansi. Utambulisho na utakaso wa DNA, RNA, na Protini ni hatua muhimu katika taratibu za uchunguzi. Electrophoresis ni mbinu ambayo hutenganisha na kutambua biomolecules katika electrophoresis ya gel na electrophoresis ya juu zaidi ya kapilari ya gel. Electrophoresis ya gel hufanywa kwa ndege ya wima au ya mlalo kwa kutumia gel ya polima ya ukubwa wa kawaida wa pore ambapo electrophoresis ya capillary inafanywa katika tube ya kapilari na kioevu cha polima au gel. Hii ni tofauti kati ya electrophoresis ya capillary na electrophoresis ya gel. Baada ya kukamilika kwa mbinu ya electrophoresis, biomolecules huchakatwa zaidi ili kupata maelezo ya kiwango cha juu kupitia mseto au kupitia mbinu kama vile uchapaji vidole.
Pakua Toleo la PDF la Capillary Electrophoresis vs Gel Electrophoresis
Unaweza kupakua toleo la PDF la makala haya na uitumie kwa madhumuni ya nje ya mtandao kulingana na dokezo la manukuu. Tafadhali pakua toleo la PDF hapa Tofauti Kati ya Gel Electrophoresis na Capillary Electrophoresis.
