Tofauti Muhimu – Gel Electrophoresis dhidi ya Ukurasa wa SDS
Gel electrophoresis ni mbinu inayotenganisha molekuli kuu katika uwanja wa umeme. Ni njia ya kawaida katika biolojia ya Molekuli kutenganisha DNA, RNA na protini kutoka kwa mchanganyiko kulingana na saizi zao za molekuli. Ukurasa wa SDS ni aina ya gel electrophoresis ambayo hutumiwa kutenganisha protini kutoka kwa mchanganyiko wa protini kulingana na ukubwa wao. Electrophoresis ya gel ni neno linalotumiwa kurejelea mbinu ya kawaida inayotumika kwa DNA, RNA, na kutenganisha protini wakati Ukurasa wa SDS ni aina moja ya elektrophoresis ya jeli. Hii ndio tofauti kuu kati ya electrophoresis ya gel na Ukurasa wa SDS.
Gel Electrophoresis ni nini?
Gel electrophoresis ni mbinu ya kawaida inayotumiwa katika maabara kutenganisha molekuli zinazochajiwa kama vile DNA, RNA, protini, n.k. kutoka kwa mchanganyiko wake. Gel hutumiwa katika electrophoresis ya gel. Inafanya kama ungo wa Masi. Kuna aina mbili za jeli zinazotumika katika gel electrophoresis yaani agarose na polyacrylamide. Uteuzi wa maandalizi ya gel na gel ni mambo muhimu ya kuzingatiwa katika electrophoreses ya gel tangu ukubwa wa pore wa gel unapaswa kudanganywa kwa uangalifu kwa mgawanyiko mzuri wa molekuli kupitia electrophoresis ya gel. Gel electrophoresis ina uwanja wa umeme unaounganishwa na ncha mbili za gel. Ncha moja ya jeli inaonyesha chaji chanya huku ncha nyingine ikiwa imechajiwa hasi.
DNA na RNA ni molekuli zenye chaji hasi. Mara tu wanapopakiwa kwenye gel kutoka mwisho mbaya wa gel na kutumika kwenye uwanja wa umeme, huhamia kupitia pores ya gel kuelekea mwisho wa chaji chanya. Kasi ya uhamiaji inategemea malipo na ukubwa wa molekuli. Molekuli ndogo huhama kwa urahisi kupitia matundu ya jeli kuliko molekuli kubwa. Kwa hivyo, molekuli ndogo husafiri umbali mrefu kupitia jeli na molekuli kubwa husafiri umbali mfupi. Kuchunguza kusafiri kwa molekuli kwenye gel, aina maalum za rangi hutumiwa. Sehemu ya umeme inatumika kwa muda fulani na kusimamishwa ili kuzuia upotezaji wa molekuli na kuweka molekuli kwenye nafasi zao za kusafiri. Bendi tofauti zinaweza kuzingatiwa katika gel. Mikanda hii inawakilisha molekuli za ukubwa tofauti. Kwa hivyo, elektrophoresis ya jeli ni muhimu kutofautisha molekuli kulingana na saizi zao.
Elektrophoresis ya gel imejumuishwa katika mbinu mbalimbali kama mbinu ya maandalizi katika baiolojia ya Molekuli kama vile PCR, RFLP, cloning, mpangilio wa DNA, uzuiaji wa kusini, ramani ya jenomu, n.k.
Kielelezo 01: Agarose gel electrophoresis
Ukurasa wa SDS ni nini?
Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS Page) ni aina ya elektrophoresis ya jeli inayotumiwa kutenganisha protini. Wakati gel electrophoresis inatumiwa kutenganisha protini, matibabu maalum yanahitajika kwa kuwa protini hazichajiwi hasi kama DNA na RNA na hazihami kuelekea mwisho mzuri au mwisho hasi. Kwa hivyo, protini hutolewa na kufunikwa na malipo hasi kabla ya electrophoresis ya gel. Inafanywa kwa kutumia sabuni inayoitwa sodium dodecyl sulfate (SDS). Electrophoresis ya jeli ambayo hutumia SDS na jeli ya Polyacrylamide kwa nyenzo inayounga mkono inajulikana kama Ukurasa wa SDS. Mbinu hii hutumiwa kwa wingi katika biokemia, genetics, forensics na biolojia ya molekuli.
Wakati wa Ukurasa wa SDS, protini huchanganywa na SDS. SDS hufunua protini katika umbo la mstari na kuzipaka chaji hasi sawia na molekuli yao ya molekuli. Kwa sababu ya chaji hasi, molekuli za protini huhamia mwisho wa chaji chanya ya gel na kujitenga kulingana na molekuli zao. Katika Ukurasa wa SDS, Polyacrylamide hutumiwa kama tegemeo thabiti la jeli. Mgawanyiko halisi wa protini hasa inategemea mali ya gel. Kwa hivyo, maandalizi ya gel ya Polyacrylamide yanapaswa kufanywa kwa uangalifu na viwango sahihi vya Polyacrylamide vinapaswa kutumika. Geli za Polyacrylamide zinaonyesha mwonekano wa juu kuliko jeli za agarose. Kwa hivyo, Ukurasa wa SDS unachukuliwa kuwa mbinu ya msongo wa juu wa kutenganisha protini.
Ukurasa wa SDS ni aina ya elektrophoresis ya gel. Ina kikomo kikubwa katika uchambuzi wa protini. Kwa kuwa SDS hubadilisha protini kabla ya kutenganishwa, hairuhusu ugunduzi wa shughuli za enzymatic, mwingiliano wa kufunga protini, viambatanisho vya protini, n.k.
Kielelezo 02: ukurasa wa SDS
Kuna tofauti gani kati ya Gel Electrophoresis na Ukurasa wa SDS?
Gel Electrophoresis vs Ukurasa wa SDS |
|
| Elektrophoresis ya gel ni mbinu inayotekelezwa kutenganisha makromolekuli kwa kutumia uga wa umeme. | Ukurasa wa SDS ni mbinu ya ubora wa juu ya gel electrophoresis inayotumiwa kutenganisha protini kulingana na wingi wao. |
| Gel Run | |
| Inaweza kutekelezwa kwa njia ya mlalo au wima. | Ukurasa wa SDS daima huendeshwa kiwima. |
| Misingi ya Kutengana | |
| Kutengana hutokea kulingana na chaji na ukubwa. | Mtengano wa protini hutokea kulingana na wingi na chaji. |
| Azimio | |
| Elektrophoresis ya jeli ya Agarose ina mwonekano wa chini na electrophoresis ya jeli ya polyacrylamide ina mwonekano wa juu zaidi | Ukurasa wa SDS una mwonekano bora zaidi. |
| Denaturation | |
| Elektrophoresis ya gel inajumuisha mbinu za uwekaji denaturing na zisizo za kuleta denaturing. | Ukurasa wa SDS hubadilisha protini kabla ya kutengana. |
Muhtasari – Gel Electrophoresis dhidi ya Ukurasa wa SDS
Gel electrophoresis ni mbinu ya kawaida inayotumika kutenganisha na kuchanganua DNA, RNA na protini kulingana na ukubwa na chaji. Kuna aina mbili kuu za electrophoresis ya gel yaani electrophoresis ya gel ya agarose na electrophoresis ya gel ya polyacrylamide. Gel za Agarose hutumiwa hasa kwa kujitenga kwa asidi ya nucleic; wakati azimio la juu linahitajika, geli za Polyacrylamide hutumiwa. Ukurasa wa SDS ni aina ya elektrophoresis ya jeli ambayo hutumiwa kwa kawaida kutenganisha michanganyiko changamano ya protini. Inachukuliwa kuwa mbinu ya utengano wa protini yenye azimio la juu. Hii ndio tofauti kati ya gel electrophoresis na Ukurasa wa SDS.
