Tofauti kuu kati ya upimaji wa rangi na florometric ni kwamba upimaji wa rangi huamua mkusanyiko wa misombo ya rangi katika myeyusho huku kipimo cha florometriki huamua utaratibu wa kinetic wa suluhu.
Upimaji wa kemikali ya kibayolojia ni mbinu inayotambua au kubainisha shughuli za molekuli ya kibayolojia au dutu kiuchanganuzi. Ni mchakato wa in vitro. Upimaji wa rangi na upimaji wa florometri ni aina mbili za majaribio ya kawaida ya kibayolojia yanayofanywa katika maabara. Mbinu nyingi kama vile ELISA na ukaushaji wa kimagharibi pia ni majaribio changamano ya kibayolojia kwa ajili ya kukadiria shughuli za kimetaboliki na kipimo cha tabia ya utendaji ya molekuli za kibayolojia kama vile protini, vimeng'enya na molekuli nyingine ndogo. Aina hizi za majaribio hutumika kutambua mwingiliano wa protini-DNA, protini-RNA na protini-protini.
Upimaji wa Rangi ni nini?
Upimaji wa rangi ni mbinu inayobainisha mkusanyiko wa misombo ya rangi katika myeyusho. Kwa maneno mengine, upimaji wa rangi ni majibu ambayo husababisha mabadiliko ya rangi kutokana na mmenyuko wa enzymatic au kemikali kati ya vitendanishi na uchanganuzi. Upimaji wa rangi hufanywa katika biokemi ili kupima vimeng'enya, misombo maalum, homoni, kingamwili na uchanganuzi mwingine. Wanatumia colorimeters au spectrophotometers. Colorimeters ni vyombo vinavyoonyesha sampuli za rangi ili kutoa kipimo cha lengo la sifa za rangi. Kipima picha ni kifaa kinachopima ukubwa wa mwanga kama kipengele cha kukokotoa rangi au urefu wa mawimbi ya mwanga.
Kielelezo 01: Kipimo cha Rangi
Je, Tathmini ya Rangi Hufanya Kazi Gani?
Katika kipimo cha rangi, sahani hutayarishwa ikiwa na kingamwili fulani iliyounganishwa kwenye visima. Kisha sampuli huongezwa. Hii inaweza kuruhusu sampuli kushikamana na kingamwili. Kisha kingamwili ya kutambua na substrate huongezwa kwenye visima ili kukabiliana na uchunguzi wa utambuzi. Suluhisho la kuacha linaongezwa mwishoni kabla ya kusoma. Kisima tupu kinachoitwa tupu huachwa bila sampuli. Katika upimaji wa rangi, rangi nyeusi, mkusanyiko mkubwa wa analyte. Kawaida, urefu wa wimbi moja tu unahitajika kuchukua usomaji. Lakini ikiwa kuna kipimo cha marejeleo, urefu wa wimbi mbili au zaidi hutumika.
Uchambuzi wa Fluorometric ni nini?
Kipimo cha florometriki ni mbinu inayobainisha utaratibu wa kinetic wa athari za kimeng'enya. Uchunguzi wa fluorometric hufanyika kwa uundaji wa bidhaa ya fluorescent kutoka kwa substrate isiyo ya fluorescent au kinyume chake. Kipimo hiki pia kinatumia uhamishaji wa nishati ya mwangwi wa umeme (FRET) ambapo, mmenyuko wa enzymatic hubadilisha nafasi ya florafori mbili kwenye substrate hivyo, kubadilisha kiwango cha umeme.
Kielelezo 02: Kipimo cha Fluorometric
Vipimo vya fluorometric kwa ujumla ni nyeti zaidi kuliko majaribio mengine. Makadirio ya kimeng'enya katika sampuli za tishu, seli au majimaji ya wagonjwa huongezeka kutokana na unyeti wake wa juu zaidi.
Je, Tathmini ya Fluorometric Inafanya Kazi?
Katika kipimo cha florometriki, sehemu ndogo huongezwa kwa sampuli katika sahani, na majibu ya umeme huchukuliwa kwa kutumia kisoma sahani. Hapa, kila seli hupimwa tofauti. Sahani za opaque hutumiwa katika vipimo vya fluorometric. Hii inapunguza kutawanyika kwa mwanga. Wavelengths mbili ni muhimu kwa aina hii ya majaribio. Urefu wa wimbi moja ni kugundua msisimko na urefu mwingine wa wimbi ni wa utoaji.
Je, Kuna Ufanano Gani Kati ya Colorimetric na Fluorometric Assay?
- Upimaji wa rangi na upimaji wa florometri ni aina mbili za majaribio ya kibayolojia.
- Majaribio yote mawili hufanywa kwa uchunguzi wa kimatibabu.
- Majaribio haya yanahusisha mmenyuko wa enzymatic.
- Majaribio yote mawili yanahusisha sehemu ndogo na uchanganuzi.
Kuna Tofauti gani Kati ya Upimaji wa Rangi na Fluorometric?
Upimaji wa rangi ni mbinu inayobainisha mkusanyiko wa viambata vya rangi katika myeyusho, ilhali upimaji wa florometriki ni mbinu inayobainisha utaratibu wa kinetic wa athari za kimeng'enya. Kwa hivyo, hii ndio tofauti kuu kati ya upimaji wa rangi na fluorometric. Aidha, vipimo vya fluorometric ni nyeti zaidi kuliko vipimo vya rangi; kwa hivyo, vipimo vya fluorometric vina uwezo wa kugundua wachambuzi zaidi. Kwa hivyo, hii ni tofauti nyingine muhimu kati ya upimaji wa rangi na fluorometric. Zaidi ya hayo, vipimo vya florometri huhitaji urefu wa mawimbi mawili, huku vipimo vya rangi vinafanywa kwa urefu mmoja wa wimbi.
Infografia iliyo hapa chini inaorodhesha tofauti zaidi kati ya kipimo cha rangi na kipimo cha florometri.
Muhtasari – Colorimetric vs Fluorometric Assay
Upimaji wa kemikali ya kibayolojia ni mchakato wa uchanganuzi unaotumiwa kubainisha na kubainisha miitikio ya kimetaboliki ya seli. Upimaji wa rangi na upimaji wa fluorometric ni aina mbili za majaribio ya biochemical. Upimaji wa rangi ni mmenyuko unaosababisha mabadiliko ya rangi kutokana na mmenyuko wa enzymatic au kemikali kati ya vitendanishi na uchanganuzi huku upimaji wa florometriki ni mbinu ambayo hutumiwa kubainisha utaratibu wa kinetic wa miitikio ya kimeng'enya. Vipimo vyote viwili hutegemea mmenyuko wa enzymatic unaohusisha substrate na analyte. Vipimo vya fluorometric ni nyeti zaidi kuliko vipimo vya rangi. Muhimu zaidi, vipimo vya fluorometric zinahitaji urefu wa mawimbi mawili, wakati vipimo vya rangi vinaweza kufanywa kwa urefu mmoja tu. Kwa hivyo, hii ni muhtasari wa tofauti kati ya kipimo cha rangi na florometriki.
