Tofauti kuu kati ya uwekaji madoa unaoendelea na unaorudi nyuma ni kwamba katika upakaji madoa unaoendelea, tishu huachwa kwenye suluhu ya madoa kwa muda wa kutosha kufikia mwisho unaohitajika huku ikiwa katika uwekaji madoa wa kurudi nyuma, tishu huachwa kwa makusudi kwa kuzidisha madoa hadi rangi hujaa vipengele vyote vya tishu na kisha kutoweka.
Kupaka rangi ni mbinu inayoangazia na kutofautisha vijenzi vya tishu na kuifanya iwezekane kuchunguzwa kwa darubini. Uwekaji madoa wa H na E ni utaratibu wa jumla wa kuchafua tishu ambao hutumiwa sana katika histolojia. Inatumia haematoxylin na eosin (counterstain). Madoa ya nyuklia kwa kutumia haematoksilini yanaweza kukamilishwa kwa mbinu zinazoendelea au za kurudi nyuma. Baadhi ya michanganyiko ya haematoksilini hutumiwa katika upakaji madoa unaoendelea. Hematoxylin ya Mayer ni mfano mmoja. Madoa yanayoendelea yana mkusanyiko mdogo wa haematoksilini. Kwa hivyo, polepole na kwa kuchagua huchafua chromatin. Michanganyiko mingine hutumika katika uwekaji madoa wa kurudi nyuma. Harris haematoxylin hutumiwa katika uwekaji madoa wa kurudi nyuma. Madoa ya kurudi nyuma yana mkusanyiko mkubwa wa haematoxylin; kwa hivyo, doa husambaa kwa kasi kwenye seli nzima.
Upakaji Madoa Unaoendelea ni nini?
Udoa unaoendelea ni mbinu inayoruhusu tishu katika myeyusho wa madoa kwa muda wa kutosha kufikia sehemu ya mwisho inayohitajika. Kwa hiyo, ufuatiliaji wa mara kwa mara wa ubora wa stain unahitajika ili kuamua kukamilika kwa uchafu. Nguvu ya upakaji madoa inadhibitiwa na wakati wa kuzamisha.
Kielelezo 01: Muundo wa Haematoxylin
Gill's haematoxylin na Mayer's haematoxylin zina maendeleo kwa asili. Kwa hematoxylings hizi mbili, muda wa kuchafua wa dakika 5-10 hutumiwa kwa kawaida katika uchafu unaoendelea. Kwa ujumla, hematoksilini zinazoendelea hazizingatiwi. Kwa hivyo, polepole na kwa kuchagua huchafua chromatin. Katika uwekaji madoa unaoendelea, haematoksilini hutia doa kromatini kwa kiwango kinachohitajika. Kwa hivyo, haihitaji kutofautisha katika pombe ya asidi iliyoyeyushwa ili kutoa doa iliyozidi.
Je, Upakaji Madoa wa Kurudi ni nini?
Madoa ya kurudi nyuma ni mbinu ya haraka zaidi ya kutia rangi ambapo tishu hutiwa madoa kimakusudi hadi rangi ijaze vijenzi vyote vya tishu. Kisha tishu hutolewa kwa kuchagua hadi kufikia mwisho sahihi. Hatua ya kuondoa madoa inaitwa utofautishaji. Tofauti hufanywa ili kuondoa stains nyingi. Kwa kawaida, hufanywa kwa kutumia pombe ya asidi ya dilute.
Kielelezo 02: H na E Staining
Harris haematoxylin ndiyo aina maarufu ya haematoxylin. Hematoxylins za Ehrlich na Delafield pia hutumiwa katika uwekaji madoa wa kurudi nyuma. Madoa ya kurudi nyuma yana mkusanyiko mkubwa wa haematoxylin. Kwa hivyo, hueneza seli nzima kwa haraka na hutia doa chromatin na saitoplazimu. Madoa ya kurudi nyuma yanapendekezwa wakati upambanuzi wazi kabisa wa vipengele vya tishu unahitajika.
Je, Kuna Ufanano Gani Kati ya Upakaji Madoa Unaoendelea na Unaopungua?
- Udoa unaoendelea na unaorudi nyuma ni aina mbili za mbinu za upakaji madoa.
- Wote wanatumia rangi inayoitwa haematoxylin.
Je, ni tofauti gani kati ya Udoa wa Maendeleo na Ulegezaji?
Uwekaji madoa unaoendelea ni mchakato wa polepole wa kutia rangi ambapo tishu huachwa kwenye suluhu ya madoa kwa muda wa kutosha kufikia sehemu ya mwisho inayohitajika. Kinyume chake, uwekaji madoa wa kurudi nyuma ni mchakato wa haraka zaidi wa kuweka madoa ambapo tishu hutiwa madoa kwa makusudi na kisha kuchafuliwa. Kwa hivyo, hii ndiyo tofauti kuu kati ya uwekaji madoa unaoendelea na unaorudi nyuma.
Aidha, tofauti nyingine kubwa kati ya uwekaji madoa unaoendelea na unaorudi nyuma ni kwamba upakaji madoa unaoendelea hauhitaji hatua ya ziada inayoitwa upambanuzi, ilhali madoa ya kurudi nyuma yanahitaji utofautishaji ili kuondoa madoa ya ziada. Kando na hayo, madoa yanayoendelea yana mkusanyiko mdogo wa haematoksilini, ilhali madoa yanayorudi nyuma yana mkusanyiko wa juu wa haematoksilini.
Infografia iliyo hapa chini inaweka jedwali la tofauti zaidi kati ya upakaji madoa unaoendelea na unaorudi nyuma.
Muhtasari – Progressive vs Regressive Madoa
Uwekaji madoa unaoendelea ni mbinu ya uwekaji madoa polepole ambapo tishu huachwa kwenye myeyusho wa madoa kwa muda wa kutosha kufikia sehemu ya mwisho. Kwa hiyo, juu ya Madoa si kufanyika ni maendeleo Madoa. Kinyume chake, uwekaji madoa wa kurudi nyuma ni mbinu ya uwekaji madoa ya haraka zaidi ambapo tishu hutiwa madoa na kisha kuchafuliwa. Uchafuaji unaoendelea hauhitaji upambanuzi (kuondoa doa la ziada) wakati madoa ya kurudi nyuma yanahitaji utofautishaji katika pombe ya asidi ya dilute ili kuondoa doa kupita kiasi. Madoa yanayoendelea kwa ujumla huwa na mkusanyiko mdogo wa haematoksilini ilhali madoa ya kurudi nyuma yana mkusanyiko zaidi wa haematoksilini. Kwa hivyo, hii ni muhtasari wa tofauti kati ya madoa yanayoendelea na ya kurudi nyuma.
