Tofauti kuu kati ya bradford na upimaji wa protini wa lowry ni kwamba upimaji wa protini wa Bradford unategemea mabadiliko ya kunyonya ya rangi ya Coomassie brilliant blue G-250 huku upimaji wa protini ya Lowry unatokana na athari ya ioni za shaba (Cu+) huzalishwa na uoksidishaji wa vifungo vya peptidi na kitendanishi cha Folin-Cioc alteu.
Tathmini ni mbinu ya uchanganuzi ambayo husaidia kubainisha vipengele vikuu vya utendaji vya sampuli. Kwa hivyo, mtihani unaweza kuwa mtihani wa ubora au kiasi. Sehemu nyingi ikiwa ni pamoja na dawa za maabara, famasia, biolojia ya mazingira, biolojia ya molekuli, biokemia, na chanjo hutumia aina hii ya majaribio mara kwa mara. Tathmini ya protini ya Bradford na Lowry ni majaribio mawili ya kibayolojia ambayo huamua ukolezi wa protini katika sampuli ya suluhu. Vipimo vyote viwili hutumia mbinu za rangi ili kutoa matokeo.
Uchambuzi wa Protein wa Bradford ni nini?
Kipimo cha protini cha Bradford ni utaratibu wa haraka wa uchanganuzi wa spectroscopic wa uchanganuzi wa protini. Inaonyesha usahihi wa juu wakati wa kupima mkusanyiko wa protini katika suluhisho. Marion Bradford alianzisha utaratibu huu mwaka wa 1976. Katika jaribio hili, mmenyuko wa jumla unategemea muundo wa amino asidi ya protini zilizopimwa. Kwa maneno mengine, mtihani wa protini wa Bradford ni mtihani wa rangi. Inatumia rangi ya Coomassie buluu inayong'aa. Kwa hivyo, mtihani huu wa protini ya rangi hutegemea mabadiliko ya kunyonya ya rangi. Coomassie blue brilliant G-250 ipo katika miundo mitatu: cationic (nyekundu), anionic (bluu) na neutral (kijani). Wakati wa hali ya tindikali, aina nyekundu ya rangi hubadilishwa kuwa bluu. Inathibitisha kufungwa kwa protini. Ikiwa protini haipo, suluhisho linaweza kubaki katika rangi ya kahawia.
Kielelezo 01: Kipimo cha protini cha Bradford
Kipimo cha protini cha Bradford ni tofauti na vipimo vingine vya protini kwa kuwa haishambuliki sana na miingiliano ya misombo mbalimbali ya kemikali iliyo katika myeyusho wa protini. Michanganyiko hii ni pamoja na sodiamu, potasiamu, glukosi na sucrose, n.k.
Upimaji wa protini ya Lowry ni nini?
Kipimo cha chini cha protini ni kipimo cha biokemikali kinachotumiwa kubainisha jumla ya kiwango cha protini katika myeyusho. Oliver H. Lowry ndiye mtu ambaye alianzisha reagent hii mwaka wa 1940. Utaratibu unaonyesha mkusanyiko wa protini ya jumla ya ufumbuzi kwa mabadiliko ya rangi ambayo ni sawa na mkusanyiko wa protini katika suluhisho. Kwa hivyo, hii pia ni kipimo cha protini ya rangi.
Mwitikio kati ya ioni za shaba (Cu+) zinazozalishwa na uoksidishaji wa bondi za peptidi na kitendanishi cha Folin-Cioc alteu ndio msingi wa utaratibu huu. Pia, reagent hii ina asidi ya phosphomolybdic na asidi ya phosphor-tungstic. Walakini, utaratibu wa mmenyuko wa upimaji wa protini ya Lowry haueleweki vizuri. Lakini inahusisha uoksidishaji wa mabaki ya cysteine, tryptophan na tyrosine kwa kupunguzwa kwa kitendanishi cha Folin–Cioc alteu.
Kielelezo 02: Kipimo cha protini kidogo
Mabaki ya cysteine huchangia katika ufyonzaji unaozingatiwa katika upimaji wa protini ya Lowry na majibu husababisha molekuli ya buluu angavu; heteropoly molybdenum bluu. Kupunguzwa kwa molekuli hii hupimwa kwa kunyonya kwa 660nm. Kwa hivyo, mkusanyiko wa mabaki ya cysteine na tryptophan ambayo ilipunguza kitendanishi cha Folin-Cioc alteu huondoa mkusanyiko wa jumla wa protini katika myeyusho.
Je, Ni Nini Zinazofanana Kati ya Bradford na Lowry Protein Assay?
- Vipimo vya protini vya Bradford na Lowry huamua ukolezi wa protini katika suluhu.
- Njia zote mbili ni mbinu za rangi.
- Pia, unyeti wa mbinu zote mbili ni wa juu.
Nini Tofauti Kati ya Bradford na Lowry Protein Assay?
Bradford na Lowry protini assay ni aina mbili za majaribio ambayo huamua ukolezi wa protini katika suluhu. Kipimo cha protini cha Bradford kinategemea mabadiliko ya ufyonzaji wa rangi ya rangi ya samawati ya Coomassie ya G-250 huku upimaji wa protini ya Lowry unategemea mwitikio wa ayoni za shaba zinazozalishwa na uoksidishaji wa vifungo vya peptidi, na kitendanishi cha Folin-Cioc alteu. Kwa hivyo, hii ndio tofauti kuu kati ya mtihani wa protini wa Bradford na Lowry. Upimaji wa protini ya Bradford huchukua dakika 15 kutoa matokeo huku upimaji wa protini ya Lowery huchukua dakika 40-60 kutoa matokeo. Hivyo, hii ni tofauti nyingine kati ya Bradford na Lowry protini assay. Zaidi ya hayo, uchanganuzi wa protini ya Bradford unategemea muundo wa asidi ya amino wakati upimaji wa protini ya Lowry unategemea kwa kiasi utungaji wa asidi ya amino. Kwa hivyo, hii pia ni tofauti kati ya Bradford na Lowry protini assay.
Inforaphic hapa chini inatoa maelezo zaidi kuhusu tofauti kati ya Bradford na Lowry protini assay.
Muhtasari – Bradford vs Lowry Protein Assay
Tathmini ni mbinu ya uchanganuzi inayotumiwa kubainisha kipengele kikuu cha utendaji kazi cha sampuli. Upimaji wa protini wa Bradford na Lowry ni aina mbili za majaribio ya protini ambayo hufanya kazi chini ya mbinu za rangi. Vipimo vya protini vya Bradford na Lowry huamua mkusanyiko wa protini katika suluhisho. Walakini, tofauti kuu kati ya Bradford na Lowry Protein Assay iko kwenye mbinu ya rangi wanayotumia. Kipimo cha protini cha Bradford kinatumia Coomassie blue brilliant G-250 huku Lowry protein assay hutumia ayoni za shaba (Cu+) na kitendanishi cha Folin-Cioc alteu. Zaidi ya hayo, njia ya Bradford inatoa matokeo ya haraka kuliko majaribio ya protini ya Lowry. Hata hivyo, mbinu zote mbili ni mbinu nyeti sana na zinaweza kuathiriwa na vitu mbalimbali.
