Tofauti Muhimu – HPLC dhidi ya HPTLC
Tofauti kuu kati ya HPLC na HPTLC ni kwamba HPLC inaruhusu utenganishaji wa kiasi cha vijenzi katika sampuli ilhali HPTLC hairuhusu utenganisho wa kiasi wa vijenzi katika sampuli.
Chromatography ni mbinu ya utenganisho inayotumika kutenganisha na kutambua viambajengo katika mchanganyiko. HPLC na HPTLC zote ni mbinu za kromatografia. HPLC ni kromatografia ya kioevu yenye utendaji wa juu. HPTLC ni utendakazi wa juu wa kromatografia ya safu nyembamba.
HPLC ni nini?
HPLC ni kromatografia ya kioevu yenye utendaji wa juu. Ni mbinu ya uchanganuzi inayotumika kutenganisha, kutambua na kuhesabu vipengele katika mchanganyiko. Katika mbinu hii, sampuli ni kufutwa katika kutengenezea kufaa. Kisha kutengenezea na sampuli hupitishwa kupitia pampu na shinikizo fulani. Pampu imejaa nyenzo za adsorbent imara. Kisha vijenzi vingine hujifunga kwa nguvu kwa nyenzo ya kunyonya ilhali vijenzi vingine hufunga kwa urahisi. Hii inasababisha vipengele kuwa na viwango tofauti vya mtiririko kupitia pampu. Kwa hivyo, vipengele vinaweza kutenganishwa kwa urahisi.
Kielelezo 01: Mfumo wa HPLC
Nyenzo ya adsorbent inayojaza pampu inajulikana kama awamu ya tuli. Kiyeyushi kilicho na sampuli iliyoyeyushwa kinajulikana kama awamu ya simu. Pampu inayotumiwa katika mbinu hii inaitwa safu. Safu imejaa nyenzo za adsorbent, kwa kawaida, chembe za silika. Ukubwa wa chembe hizi zinaweza kuanzia 2-50 μm. Mchakato wa kujitenga unaathiriwa na utungaji wa awamu ya simu na joto la mfumo. Mwingiliano kati ya awamu ya kusimama na kijenzi katika sampuli inaweza kuwa mwingiliano wa haidrofobi, mwingiliano wa dipole-dipole, uunganishaji wa ioni, n.k.
Shinikizo la uendeshaji la HPLC ni kubwa zaidi kuliko lile la kromatografia kimiminika. Iko karibu na bar 50-350. Tofauti kati ya kromatografia ya kioevu na HPLC ni kwamba katika kromatografia ya kioevu, sampuli huanguka kupitia safu chini ya mvuto ambapo, katika HPLC, sampuli inashinikizwa kupitia safu. Ukubwa wa safu wima na chembe za kunyonya pia ni ndogo sana ikilinganishwa na kromatografia ya kimiminika ya jadi. Hata hivyo, azimio lililotolewa na mbinu ya HPLC ni bora zaidi.
HPTLC ni nini?
HPTLC ni kromatografia ya safu nyembamba ya utendaji wa juu. Ni aina ya hali ya juu na otomatiki ya TLC ya kitamaduni. Mbinu hii hutoa azimio la ufanisi kwa muda mfupi. Katika njia hii ya uchanganuzi, sampuli na marejeleo yanaweza kuchambuliwa kwa wakati mmoja, ambayo inaruhusu sampuli kulinganishwa na marejeleo. Inatoa usahihi wa uchanganuzi ulioboreshwa kuliko mbinu zingine za kromatografia. Muda unaochukuliwa kwa uchambuzi ni mdogo. Mbinu hiyo ni mbinu ya gharama ya chini.
Kielelezo 02: Uchambuzi wa Rangi za Chakula kwa kutumia HPTLC
Mbinu ya HPTLC ni mchakato rahisi, na hatua ya utayarishaji wa sampuli pia imeondolewa (Katika TLC ya kitamaduni, hatua ya utayarishaji wa sampuli imejumuishwa kabla ya kutenganisha. Hatua hii inahusisha kusafisha na uboreshaji). Kiyeyushi kinaweza kutumika moja kwa moja bila matibabu yoyote ya awali ingawa mbinu zingine za kromatografia zinahitaji matibabu ya awali kama vile kuondoa gesi, kuchuja n.k.
Nyenzo ya adsorbent inayotumika katika HPTLC ni silika yenye saizi ndogo sana za chembe. Katika TLC ya jadi, ukubwa wa chembe ya silika ni 5-20 μm ambapo, katika HPTLC, ni 4-8 μm. Sampuli inatumika kwa sahani ya HPTLC kwa kutumia mwombaji. Inatoa maombi sare na salama. Kisha sahani zimewekwa kwenye chumba kilicho na awamu ya simu. Chumba kinapaswa kujazwa na mvuke wa awamu ya simu. Baada ya mchakato wa HPTLC, matangazo ambayo yamesonga yanaweza kutambuliwa. Wakati wa kutambua madoa kwenye sahani, mbinu ya HPTLC hutumia eneo linalofaa la UV au chemba ya iodini.
Nini Tofauti Kati ya HPLC na HPTLC?
HPLC dhidi ya HPTLC |
|
| HPLC ni kromatografia kioevu yenye utendaji wa juu. | HPTLC ni kromatografia ya safu nyembamba ya utendaji wa juu. |
| Mbinu | |
| Katika HPLC, awamu ya simu iliyo na kiyeyusho hupitishwa kupitia safu wima iliyojazwa na awamu ya tuli. | Katika HPTLC, sampuli huonekana kwenye bati la TLC na huwekwa ndani ya chumba chenye awamu ya simu; kisha sampuli inaruhusiwa kuhama juu ya sahani pamoja na awamu ya simu. |
| Kipimo | |
| Katika HPLC, tofauti kati ya viwango vya mtiririko wa vijenzi kupitia safu hutumika kutenganisha vijenzi kwenye sampuli. | Katika HPTLC, tofauti kati ya umbali unaosafirishwa na kila kijenzi kwenye sampuli hutumika kutenganisha vijenzi kwenye sampuli. |
| Utengano wa Kiasi | |
| HPLC inaruhusu utenganishaji wa kiasi wa vijenzi katika sampuli. | HPTLC hairuhusu utenganishaji wa kiasi wa vijenzi katika sampuli. |
Muhtasari – HPLC dhidi ya HPTLC
HPLC na HPTLC ni mbinu mbili za kromatografia. Tofauti kuu kati ya HPLC na HPTLC ni kwamba HPLC inaruhusu utenganishaji wa kiasi wa vijenzi katika sampuli ilhali HPTLC hairuhusu utenganisho wa kiasi wa vijenzi katika sampuli.
