Tofauti Muhimu – YAC dhidi ya Vekta za BAC
Vekta hutumika katika uunganishaji wa molekuli. Vekta inaweza kufafanuliwa kama molekuli ya DNA ambayo hufanya kazi kama gari la kubeba nyenzo za kijeni za kigeni hadi seli nyingine. Vekta iliyo na DNA ya kigeni inajulikana kama DNA recombinant na inapaswa kuwa na uwezo wa kuiiga na kuionyesha ndani ya kiumbe mwenyeji. Kromosomu bandia ya chachu (YAC) na kromosomu bandia ya bakteria (BAC) ni aina mbili za vekta zinazohusika katika uundaji wa kromosomu. Tofauti kuu kati ya YAC na BAC ni kwamba YAC ni mfumo wa kivekta uliojengwa kiholela kwa kutumia eneo mahususi la kromosomu ya chachu ili kuingiza sehemu kubwa za nyenzo za kijeni kwenye seli za chachu ilhali BAC ni mfumo wa kivekta uliojengwa kiholela kwa kutumia eneo maalum la E.koli kromosomu kuingiza sehemu kubwa za DNA kwenye seli za E. koli.
Vekta za YAC ni nini?
YAC (chromosome ya Yeast artificial) ni kromosomu iliyotengenezwa kiholela ambayo ina uwezo wa kubeba sehemu kubwa ya DNA ya kigeni na kunakili ndani ya seli za chachu. Ina centromere, telomeres pamoja na mfuatano wa kujinakilisha kwa uhuru ambao ni muhimu kwa urudufishaji na uthabiti. YAC inapaswa pia kuwa na alama maalum au vialamisho na tovuti za vizuizi ili kuifanya iwe vekta ya uundaji madhubuti. Mfuatano mkubwa wa kuanzia kb 1000 hadi kb 2000 unaweza kuingizwa kwenye YAC na kuhamishiwa kwenye chachu. Ufanisi wa mabadiliko ya YAC uko chini sana.
Kielelezo 01: YAC Vector
Vidudu vya BAC ni nini?
Kromosomu Bandia ya bakteria (BAC) ni kromosomu iliyoundwa kwa ajili ya uunganishaji wa molekuli. Ina sehemu mahususi za plasmid ya E. koli F na ina mviringo na imejikunja sana. BAC imeundwa ili kuunganisha vipande vya DNA kwa bakteria, hasa kwa E. koli. Inaweza kubeba vipande vya DNA vyenye ukubwa wa hadi kb 300. Ikilinganishwa na YAC, uwekaji wa cloning wa BAC ni saizi ndogo. BACs zilitengenezwa mnamo 1992 na bado ni maarufu kwa sababu ya uthabiti wake na urahisi wa ujenzi. BACs pia ni muhimu katika kutengeneza chanjo.
Kielelezo 02: Vekta ya BAC katika uunganishaji wa molekuli
Kuna tofauti gani kati ya YAC na Vekta za BAC?
YAC vs BAC Vectors |
|
| YAC ni kromosomu iliyobuniwa kijenetiki kwa kutumia DNA ya chachu kwa madhumuni ya kuiga. | BAC ni molekuli ya DNA iliyobuniwa kwa vinasaba kwa kutumia DNA ya E. koli kwa madhumuni ya kuiga. |
| Jinsia | |
| YAC ziliundwa ili kuunda vipande vikubwa vya DNA ya jenomu kuwa chachu. | BACs zilitengenezwa kwa ajili ya kuunda vipande vikubwa vya genomic katika Escherichia coli. |
| Ingiza Urefu | |
| YACs zinaweza kuwa na vichocheo vya jeni vya ukubwa wa megabase. (kb 1000 – kb 2000). | BAC zinaweza kubeba viingilio vya kb 200–300 au chini ya hapo. |
| Ujenzi | |
| YAC DNA ni vigumu kusafisha ikiwa haijakamilika na inahitaji umakini wa juu ili kuzalisha mfumo wa vekta wa YAC. | BAC ni rahisi kuisafisha ikiwa haijakamilika na inaweza kutengenezwa kwa urahisi. |
| Chimerism | |
| YAC mara nyingi ni chimeric. | BACs si chimeric mara chache sana. |
| Utulivu | |
| YAC si dhabiti. | BAC ni thabiti. |
| Marekebisho | |
| Uchanganyaji wa chachu inawezekana sana na huendelea kutumika kila wakati. Kwa hivyo inaweza kutoa ufutaji na upangaji upya mwingine katika YAC. | E. coli recombination imezuiwa na huwashwa inapohitajika. Kwa hivyo, inapunguza upangaji upya usiotakikana katika BACs. |
| Matengenezo | |
| Kudhibiti YAC recombinant kwa kawaida huhitaji YAC kuhamishiwa kwenye E. coli kwa upotoshaji unaofuata. Kwa hivyo, ni mchakato mgumu. | Marekebisho ya BAC hutokea moja kwa moja katika E. koli. Kwa hivyo hakuna haja ya kuhamisha DNA. Kwa hivyo, mchakato si wa kazi ngumu. |
Muhtasari – YAC vs BAC Vectors
YAC imekuwa zana muhimu ya utafiti katika michakato ya kuiga kutokana na uwezo wake wa kuunganisha vipande vikubwa vya DNA kwenye kiumbe mwenyeji. Hata hivyo, YACs zina hasara kadhaa kama vekta kama vile matatizo ya ujenzi, chimerism, kukosekana kwa utulivu, nk. Kwa hiyo ili kuondokana na matatizo haya, wanasayansi wameunda vekta za BAC. BAC imeundwa kwa kutumia sehemu maalum za kromosomu ya E. koli. Ni vekta thabiti na inaweza kujengwa kwa urahisi. Hata hivyo, urefu wa DNA ambayo BAC inaweza kushughulikia ni hadi mara 20 chini ya ile ya YAC. Hii ndio tofauti kati ya mifumo ya vekta ya YAC na BAC. Siku hizi, BAC inapendelewa zaidi kuliko YAC katika maabara.
