Tofauti Muhimu – HPLC dhidi ya LCMS
Hebu kwanza tuangalie maana ya HPLC na LCMS kabla ya kuchanganua tofauti kati ya HPLC na LCMS. Chromatografia ni mbinu ya kutenganisha katika uchanganuzi wa kemikali ambapo sampuli za viambajengo hutenganishwa wakati wa kupita kwa njia ya kromatografia. Pia inahusisha mwingiliano na sampuli, awamu ya stationary, na awamu ya simu. HPLC inawakilisha High Performance Liquid Chromatography, na inatumika kama mbinu ya kromatografia ya kioevu katika kemia ya uchanganuzi. Mchanganyiko wa Kromatografia ya Kimiminika na Uchunguzi wa Misa (LCMS) umetengenezwa kwa uchanganuzi wa kiasi wa molekuli za kibayolojia zilizochaguliwa na ni utaratibu nyeti sana, sahihi na mahususi wa upimaji ikilinganishwa na HPLC. Hii ndio tofauti kuu kati ya HPLC na LCMC. Makala haya yatakuletea HPLC na LCMC zinazoshughulikia uchanganuzi wa kemikali na kujadili tofauti kati ya HPLC na LCMS.
HPLC ni nini?
Kromatografia ya utendakazi wa juu wa kioevu (HPLC) ni mbinu maarufu ya utenganisho katika kemia ya uchanganuzi. Inatumiwa hasa kutenganisha vipengele, kutambua na kupima kila sehemu katika mchanganyiko. Hapo awali, njia hii ilijulikana kama kromatografia ya kioevu ya shinikizo la juu kwa sababu ilitegemea pampu kutiririsha kiyeyushi kilichoshinikizwa kinachojumuisha mchanganyiko wa sampuli kupitia safu iliyopakiwa na nyenzo dhabiti ya adsorbent. Kila sehemu katika mchanganyiko wa sampuli huingiliana kwa njia tofauti na nyenzo dhabiti ya adsorbent, ambayo husababisha viwango tofauti vya mtiririko kwa viambajengo tofauti. Hii inaweza kusababisha kutenganishwa kwa viambajengo vinapotoka nje ya safu wima ya HPLC.
HPLC imetumika kwa matumizi mbalimbali kama vile uchanganuzi wa viwango vya vitamini D katika damu, utumiaji haramu wa dawa za wanariadha kwa kugundua mabaki ya dawa kwenye mkojo wao, kupanga viambajengo vya sampuli changamano ya kibaolojia kwa madhumuni ya utafiti na uchambuzi. na utengenezaji wa dawa.
LCMS ni nini?
Kimiminiko cha chromatography–massspectrometry (LCMS) ni mbinu ya uchanganuzi inayochanganya uwezo wa utengano wa kimwili wa kromatografia ya kioevu na uwezo wa uchanganuzi wa wingi wa spectrometry ya molekuli (MS). Kromatografia ya kioevu ni mbinu ya kutenganisha, na spectrometry ya wingi hutumiwa kuchanganua uwiano wa wingi-kwa-chaji wa chembe zinazochajiwa. Utengano wa kimwili kwa kawaida hupatikana na HPLC na vinginevyo, LCMS pia inajulikana kama HPLC-MS. LCMS ni mbinu kuu ya uchanganuzi ambayo ina usahihi wa juu sana, unyeti, na umaalum ikilinganishwa na HPLC. Kwa hivyo, ni muhimu katika matumizi mengi kama vile madhumuni ya utafiti, uchanganuzi wa madawa ya kulevya, uchanganuzi wa chakula, n.k. LCMS hutumiwa hasa kutenganisha, kutambua, kutambua na kuhesabu sifa za biokemikali ya sampuli fulani mbele ya mchanganyiko changamano wa kemikali.
Kuna tofauti gani kati ya HPLC na LCMC?
Muhtasari na ufafanuzi wa HPLC na LCMC
HPLC: HPLC inawakilisha Chromatography ya Utendaji wa Juu ya Kioevu. Ni mbinu ya utenganisho ambayo hutumiwa hasa kutenganisha vijenzi, kutambua na kuhesabu kila sehemu katika mchanganyiko.
LCMS: LCMS inawakilisha Liquid Chromatography na Mass Spectrometry. Ni mbinu ya uchanganuzi inayochanganya uwezo wa kutenganisha kimwili wa kromatografia ya kioevu na uwezo wa uchanganuzi wa wingi wa spectrometry (MS).
Sifa za HPLC na LCMC
Ainisho
HPLC: Hii ni mbinu ya Liquid Chromatography pekee.
LCMS: Huu ni mchanganyiko wa njia ya Kioevu ya Chromatography na mbinu ya Mass Spectrometry.
Ufanisi
HPLC: Ikilinganishwa na LCMS, uchanganuzi wa HPLC hauna ufanisi na polepole zaidi.
LCMS: Ikilinganishwa na HPLC, uchanganuzi wa LCMS ni mzuri na wa haraka zaidi.
Unyeti
HPLC: Ikilinganishwa na LCMS, uchanganuzi wa HPLC si nyeti sana.
LCMS: Ikilinganishwa na HPLC, uchanganuzi wa LCMS ni nyeti zaidi.
Maalum
HPLC: Ikilinganishwa na LCMS, uchanganuzi wa HPLC sio mahususi sana.
LCMS: Ikilinganishwa na HPLC, uchanganuzi wa LCMS ni mahususi zaidi.
Usahihi
HPLC: HPLC inatoa matokeo sahihi kidogo kuliko LCMS ya kubaini baadhi ya kemikali.
LCMS: LCMS inatoa matokeo sahihi zaidi kuliko HPLC katika kubaini baadhi ya kemikali.
Kijenzi
HPLC: HPLC inaweza kuchukuliwa kama sehemu ya LCMS.
LCMS: LCMS haiwezi kuzingatiwa kama sehemu ya HPLC.
Chanzo cha Ion
HPLC: Chanzo cha ioni hakipo kwenye chombo cha HPLC.
LCMS: Chanzo cha ion kipo katika chombo cha LCMS.
Maombi
HPLC: Ioni, polima, molekuli za kikaboni na biomolecules zinaweza kuchanganuliwa kwa kutumia HPLC.
LCMS: Molekuli za kikaboni na biomolecules zinaweza kuchanganuliwa. Ikilinganishwa na HPLC, LCMS inaweza kutumika kuchunguza michanganyiko ambayo haijatatuliwa kikamilifu.
Operesheni
HPLC: Mchoro wa chombo cha HPLC umetolewa katika mchoro wa 1, na kwa kawaida hujumuisha kisampuli otomatiki, pampu na kigunduzi. Sampuli huleta mchanganyiko wa sampuli katika awamu ya simu (mchanganyiko ulioshinikizwa wa viyeyusho kama vile maji, asetonitrili na/au methanoli) ambayo huihamisha hadi kwenye safu. Pampu hutoa mtiririko unaohitajika na muundo wa awamu ya simu kupitia safu. Safu hii imejazwa na adsorbent, ambayo ni chembe chembe thabiti kama vile silika au polima. Kigunduzi hutoa mawimbi yanayolingana na kiasi cha sampuli ya uwepo wa kijenzi kwenye safu, kwa hivyo kuruhusu uchanganuzi unaoweza kukadiriwa wa vijenzi vya sampuli vilivyochaguliwa. Chombo cha HPLC kinadhibitiwa, na uchanganuzi wa data hutolewa na programu ndogo ya kidijitali na programu ya mtumiaji.
Kielelezo 1: Mchoro wa chombo cha HPLC
LCMS: Mchoro wa chombo cha LCMS umetolewa katika mchoro wa 2. Sampuli ya dondoo imeingizwa kwenye safu inayojumuisha HPLC. Safu wima hii huhifadhi sampuli za metaboliti kulingana na vibambo halisi, na metaboliti tofauti hutiririka hadi kwenye kipima sauti kwa vipindi tofauti vya wakati. Utazamaji wa wingi hutumiwa kutathmini wingi wa chembe, kwa kuamua mpangilio wa kimsingi wa molekuli, na kwa kufafanua miundo ya molekuli. Hata hivyo, sampuli inapaswa kuwa ioni ili kuzalisha molekuli zinazochajiwa ili kubaini uwiano wao wa wingi hadi chaji. Kwa hivyo, badala ya zana za HPLC, LCMS ina moduli tatu za ziada kama vile chanzo cha chuma, kichanganuzi cha wingi, na kigunduzi. Chanzo cha ioni kinaweza kubadilisha sampuli ya awamu ya gesi kuwa ioni na kichanganuzi kikubwa kinachopanga ioni kulingana na wingi wao kwa kutumia sehemu za sumakuumeme. Hatimaye, kigunduzi hukadiria thamani na kutoa data ya kila ayoni iliyopo kwenye sampuli. Mbinu ya LCMS inaweza kutumika kwa matumizi ya ubora na kiasi.
Kielelezo 2: Mchoro wa chombo cha LCMS
Kwa kumalizia, HPLC ni mbinu ya kromatografia ya kioevu ilhali LCMS ni mchanganyiko wa kromatografia ya kioevu na spectrometry ya wingi. Mbinu hizi zote mbili za uchanganuzi zina sifa tofauti, lakini zinaweza kutumika kutambua na kuhesabu muundo wa chakula, dawa na molekuli zingine za kibayolojia.
