Tofauti kuu kati ya uchimbaji wa DNA ya mimea na wanyama ni kwamba katika uchimbaji wa DNA ya mmea, ni muhimu kuvunja ukuta wa seli kwa kusaga tishu kwenye barafu kavu au nitrojeni kioevu ili kutoa yaliyomo kwenye seli wakati wa uchimbaji wa DNA ya wanyama., si lazima kutekeleza hatua hii kwa kuwa seli za wanyama hazina ukuta wa seli.
Genomic DNA ni nyenzo ya kijeni ya seli za mimea na wanyama. DNA ya jenasi ni ya kipekee kwa kila mmea au mnyama. Uchimbaji wa DNA wa DNA ya ubora mzuri ni sharti la utafiti wa molekuli. DNA ya viumbe hutolewa kwa ajili ya utambuzi, utambuzi wa magonjwa, kutambua jeni na mlolongo maalum, madhumuni ya uchunguzi, uchunguzi wa baba, mpangilio wa genome na maendeleo ya madawa ya kulevya, nk. Mbinu ya uchimbaji wa DNA inatofautiana kulingana na aina ya seli - iwe ni seli ya wanyama au seli ya mmea.
Uchimbaji wa DNA ya Mimea ni nini?
DNA katika seli za mimea hutolewa kwa tafiti mbalimbali za molekuli. Inahitajika ili kutoa DNA isiyobadilika, safi ya genomic. Kwa hivyo, kuna aina tofauti za itifaki za uchimbaji wa DNA ambazo ni tofauti na itifaki za uchimbaji wa DNA kutoka kwa seli za wanyama. Hii ni kwa sababu seli za mimea zina ukuta wa seli ambao unapaswa kuvunjwa ili kuchukua maudhui ya seli.
Uchimbaji kwa kawaida hufanywa kwa kusaga tishu za mmea katika barafu kavu au nitrojeni kioevu kwa kutumia chokaa na mchi. Kisha utando wa seli huvurugika, na yaliyomo kwenye seli huchukuliwa hadi kwenye buffer ya uchimbaji. Hii kawaida hufanyika kwa kutumia sabuni; SDS (sodium dodecyl sulfate) au CTAB (cetyltrimethylammonium bromidi) bafa. DNA iliyotolewa inalindwa dhidi ya viini endogenous kwa kutumia wakala chelating kama vile EDTA. Zaidi ya hayo, protini hutenganishwa na DNA kwa kutumia klorofomu au phenoli.
Kielelezo 01: Uchimbaji wa DNA ya Mimea
Mimea huunda polisakaridi na poliphenoli, ikijumuisha flavonoidi na metabolite nyingine za pili. Michanganyiko hii inaingilia uchimbaji wa DNA safi ya genomic. Kwa hivyo, itifaki nyingi za uchimbaji wa DNA za mimea huhusisha hatua nyingine, kama vile mbinu ya upinde rangi ya kloridi ya cesium ili kuondoa misombo hii.
Nyingi za itifaki za uchimbaji wa DNA hupendekeza kutumia sampuli za majani kwa ajili ya kutoa DNA. Baadhi ya mbinu hazijumuishi kemikali hatari kama vile nitrojeni kioevu na phenoli. Itifaki ya CTAB (Cetyl trimethylammonium bromidi) ni itifaki maarufu ya uchimbaji wa DNA ya mmea ambayo hurahisisha uchimbaji wa DNA ya jenomu ya mmea wa hali ya juu. Ni njia rahisi, salama, inayotegemewa, na ya gharama nafuu ya uchimbaji wa DNA ya mimea. Mbinu zingine nyingi ni matoleo yaliyorekebishwa ya mbinu ya CTAB.
Utoaji wa DNA ya Wanyama ni nini?
Utoaji wa DNA ya Mnyama ni utoboaji wa DNA ya jeni kutoka kwa seli za wanyama kwa uchanganuzi wa molekuli. Tofauti na uchimbaji wa DNA ya mmea, kuvunjika kwa ukuta wa seli sio lazima kwa seli za wanyama kwani hazina ukuta wa seli. Seli za damu ndiyo aina ya kawaida ya seli za wanyama ambazo hutumiwa kwa madhumuni mbalimbali.
Kielelezo 02: Uchimbaji wa DNA
Mbinu ya phenol-chloroform ni mojawapo ya chaguo bora zaidi kwa seli za damu. Mavuno na ubora wa DNA ni wa juu wakati wa kutoa DNA kutoka kwa njia hii. Ni itifaki ya uchimbaji wa DNA ya kioevu-kioevu, na njia hii hutenganisha molekuli za DNA kwa misingi ya umumunyifu wao katika ufumbuzi usioweza kuunganishwa. Phenoli, klorofomu na pombe ya isoamyl ni viambato vitatu kuu vya mbinu hii.
Je, Kuna Ufanano Gani Kati ya Uchimbaji wa DNA ya Mimea na Wanyama?
- Wakati wa uchimbaji wa DNA ya mimea na wanyama, utando wa seli lazima ukatishwe.
- DNA inapaswa kulindwa dhidi ya viini asilia.
- Zaidi ya hayo, unyoaji wa DNA unapaswa kuzuiwa.
- Vifaa vya kibiashara vinapatikana kwa uchimbaji wa DNA ya mimea na DNA ya wanyama.
- Njia nyingi za uchimbaji wa DNA za mimea na wanyama zinahitaji marekebisho ya mara kwa mara na kusanifishwa.
Kuna tofauti gani kati ya Uchimbaji wa DNA ya Mimea na Wanyama?
Tofauti kuu kati ya uchimbaji wa DNA ya mimea na wanyama ni kwamba uchimbaji wa DNA ya mmea unahitaji kusaga tishu za mmea kwenye barafu kavu au nitrojeni ya kioevu ili kuvunja ukuta wa seli wakati uchimbaji wa DNA ya wanyama hauitaji hatua hii kwani wanafuga. seli hazina ukuta wa seli. Mbinu ya CTAB ni mojawapo ya mbinu bora zaidi za uchimbaji wa DNA ya mimea ilhali mbinu ya phenol-chloroform ni mojawapo ya mbinu bora zaidi za uchimbaji wa DNA ya wanyama.
Hapo chini ya infografia huweka jedwali la tofauti kati ya uchimbaji wa DNA ya mimea na wanyama.
Muhtasari – Uchimbaji wa DNA ya Mimea dhidi ya Wanyama
Njia tofauti zinapatikana kwa uchimbaji wa DNA kutoka kwa aina tofauti za seli. Kwa hiyo, itifaki za uchimbaji wa DNA za mimea hutofautiana na itifaki za uchimbaji wa DNA ya seli za wanyama. Uchimbaji wa DNA ya mimea unahitaji usumbufu wa ukuta wa seli, utando wa seli na utando wa nyuklia wakati uchimbaji wa DNA ya wanyama unahitaji kuvunjika kwa membrane ya seli na membrane ya nyuklia. Muhimu zaidi, uchimbaji wa DNA ya seli ya wanyama hauhitaji usumbufu wa kuta za seli kwa kusaga kwenye barafu kavu au nitrojeni ya kioevu. Kwa hivyo, hii ndiyo tofauti kuu kati ya uchimbaji wa DNA ya mimea na wanyama.