Tofauti kuu kati ya kubadilishana ioni na kromatografia ya kutojumuisha ukubwa ni kwamba kromatografia ya kubadilisha ioni hutumika kuchanganua vitu vya ioni kulingana na chaji ilhali kromatografia ya kutojumuisha ukubwa hutumika kuchanganua molekuli kubwa kulingana na saizi.
Chromatography ni mbinu ya uchanganuzi inayoweza kutumiwa kuchanganua michanganyiko tofauti. Mbinu za chromatografia zinaitwa kulingana na kigezo kilichotumiwa kuchambua vitu - k.m. kutengwa kwa saizi ya kromatografia, kromatografia ya kubadilishana ioni, n.k.
Chromatography ya Ion Exchange ni nini?
Kromatografia ya kubadilisha ion ni mbinu ya uchanganuzi ambayo tunaweza kuchanganua dutu za ioni. Mara nyingi ni muhimu kuchanganua anions na cations isokaboni (yaani anii za kloridi na nitrate na potasiamu, kasheni za sodiamu). Ingawa sio njia ya kawaida sana, tunaweza kuchambua ioni za kikaboni kwa kuitumia. Zaidi ya hayo, tunaweza kutumia mbinu hii kwa utakaso wa protini kwa sababu protini huchajiwa molekuli katika viwango fulani vya pH. Hapa, tunatumia awamu ya kusimama imara ambayo chembe za kushtakiwa zinaweza kushikamana. Kwa mfano, tunaweza kutumia resin polystyrene-divinylbenzene copolymers kama msaada thabiti.
Kielelezo 01: Nadharia nyuma ya Ion Exchange Chromatography
Ili kuelezea hili zaidi, awamu ya kusimama ina ayoni zisizobadilika kama vile anions za salfa au amini za quaternary. Kila moja ya hizi inapaswa kuhusishwa na ioni ya kaunta (ioni yenye chaji kinyume) ikiwa tutadumisha kutoegemea upande wowote kwa mfumo huu. Ikiwa ioni ya kukabiliana ni cation, basi tunataja mfumo kama resin ya kubadilishana mawasiliano. Lakini, ikiwa counterion ni anion, mfumo ni resin kubadilishana anion. Zaidi ya hayo, kuna hatua tano kuu katika kromatografia ya kubadilishana ioni:
- Hatua ya awali
- Mwelekeo wa lengwa
- Kuanza kwa uhariri
- Mwisho wa maoni
- Kuzaliwa upya
Chromatography ya Kutengwa kwa Ukubwa ni nini?
Kromatografia ya kutojumuisha ukubwa au SEC ni mbinu ya uchanganuzi ambapo molekuli katika mchanganyiko zinaweza kutenganishwa kwa ukubwa na uzito wa molekuli. Kawaida, inafanya kazi na molekuli kubwa zinazoitwa macromolecules. Kwa kawaida, suluhisho la maji hutumiwa kwa uchambuzi. Kisha inaitwa chromatografia ya uchujaji wa gel. Wakati kutengenezea kikaboni, huitwa chromatography ya gel.
chromatography ya uchujaji wa gel ni aina ya kromatografia ya kutojumuisha ukubwa ambapo tunatumia mmumunyo wa maji kama awamu ya simu ya mkononi. Kwa hiyo, awamu ya simu tunayotumia mara nyingi katika mbinu hii ni buffer yenye maji. Pia, tunatumia safu ya chromatographic kwa utengano huu, na tunahitaji kufunga safu na shanga za porous. Kawaida, Sephadex na agarose ni muhimu kama nyenzo za porous. Kwa hivyo, nyenzo hizi ni sehemu ya tuli ya majaribio yetu. Zaidi ya hayo, tunaweza kutumia saizi ya pore ya shanga hizi kuamua saizi ya macromolecules ambayo tunatenganisha. Hata hivyo, ni makadirio tu.
Kielelezo 02: Kifaa cha Kutenga Ukubwa wa Chromatography
Kromatografia ya upenyezaji wa gel ni aina ya kromatografia ya kutojumuisha ukubwa ambapo tunatumia kiyeyushi hai kama awamu ya simu. Kwa hivyo, tunaweza kutumia suluhu kama vile hexane na toluini kwa kusudi hili. Awamu ya stationary ni nyenzo ya porous, sawa na katika chromatografia ya filtration ya gel. Mbinu hii mara nyingi hutumiwa kwa polima na nyenzo zingine za kikaboni-mumunyifu. Mbinu ya utendaji ya mbinu hiyo ni sawa na ile ya kromatografia ya kuchuja jeli.
Kuna tofauti gani kati ya Ubadilishanaji wa Ion na Chromatography ya Kutengwa kwa Ukubwa?
Chromatography ni mbinu ya uchanganuzi inayoweza kutumiwa kuchanganua michanganyiko tofauti. Tofauti kuu kati ya kubadilishana ioni na kromatografia ya kutengwa kwa ukubwa ni kwamba kromatografia ya kubadilisha ioni hutumika kuchanganua vitu vya ioni kulingana na chaji ilhali kromatografia ya kutojumuisha ukubwa hutumika kuchanganua molekuli kubwa kulingana na saizi.
Hapo chini ya infographic inatoa maelezo zaidi kuhusu tofauti kati ya kubadilishana ioni na kromatografia ya kutojumuisha ukubwa.
Muhtasari – Ion Exchange dhidi ya Kutengwa kwa Ukubwa Chromatography
Chromatography ni mbinu ya uchanganuzi inayoweza kutumiwa kuchanganua michanganyiko tofauti. Tofauti kuu kati ya kubadilishana ioni na kromatografia ya kutengwa kwa ukubwa ni kwamba kromatografia ya kubadilisha ioni hutumika kuchanganua vitu vya ioni kulingana na chaji ilhali kromatografia ya kutojumuisha ukubwa hutumika kuchanganua molekuli kubwa kulingana na saizi.
