Tofauti kuu kati ya gradient sucrose na sucrose cushion ultracentrifugation ni kwamba katika sucrose gradient ultracentrifugation, sucrose gradient inayoendelea hutumiwa, huku kwenye sucrose cushion ultracentrifugation, discontinuous sucrose gradient inatumika..
Sucrose gradient na sucrose cushion ultracentrifugation ni aina mbili zinazofanana za mbinu zinazotumika kutenganisha aina mahususi za macromolecules. Katika mbinu zote mbili, gradient ya wiani wa sucrose hutumiwa. Lakini katika ultracentrifugation ya gradient ya sucrose, gradient ya wiani inayoendelea hutumiwa wakati, katika sucrose cushion ultracentrifugation, gradient ya discontinuous density hutumiwa.
Sucrose Gradient Ultracentrifugation ni nini?
Sucrose gradient ultracentrifugation ni mbinu inayoweza kutumika kugawanya molekuli kuu kama vile DNA, RNA na protini. Kuna hatua kadhaa katika mbinu hii. Wao ni maandalizi ya sucrose gradient, centrifugation, kujitenga na elution. Maandalizi ya gradient ni hatua muhimu katika mbinu hii. Katika mbinu hii, sampuli iliyo na macromolecules ya ukubwa tofauti imewekwa kwenye uso wa safu ya sucrose gradient. Wakati wa kuweka katikati, mabaki ya ukubwa tofauti hupita kwenye safu wima ya sucrose kwa viwango tofauti. Mchanga hutegemea mambo kadhaa, ikiwa ni pamoja na nguvu ya centrifugation, sura ya ukubwa na msongamano wa macromolecules, msongamano na mnato wa gradient. Mwishoni mwa centrifugation, macromolecules ni spatially kutengwa na wiani. Macromolecules kubwa zaidi (makromolekuli zenye msongamano wa juu) hutiririka kuelekea chini. Nyepesi (macromolecules ya chini-wiani) hubakia juu ya gradient. Kwa hivyo, molekuli hutengana kama bendi tofauti. Kisha bendi zinapaswa kutengwa, na utakaso wa macromolecule maalum kutoka kwa sucrose lazima ufanyike.
Kielelezo 01: Sucrose Gradient Ultracentrifugation
Kwa upande wa matumizi, mbinu hii inatumika sana kugawanya molekuli za DNA. Sucrose gradient ultracentrifugation ni kawaida kutumika kubainisha protini changamano ukubwa na muundo. Zaidi ya hayo, mbinu hii inatumika kwa utakaso wa sehemu ya mRNA.
Sucrose Cushion Ultracentrifugation ni nini?
Sucrose cushion ultracentrifugation ni mbinu nyingine inayowezesha mgawanyo wa macromolecules. Tofauti na upenyezaji wa kipenyo cha msongamano wa sucrose, upitishaji wa juu wa mto wa sucrose hutumia kipenyo kisichoendelea cha msongamano. Mkusanyiko wa sucrose huongezeka kutoka juu hadi chini kwa hatua tofauti. Katika mbinu hii, kujitenga kunapatikana kwa kuweka dondoo iliyofafanuliwa juu ya kiasi kidogo cha suluhisho la sucrose kwenye tube ya centrifuge, kinachojulikana kama mto wa sucrose. Hii inaruhusu utengano bora katika centrifugation ya kasi ya juu. Wakati molekuli zinatengana kama bendi kati ya mto wa sucrose, bendi nyeupe inaweza kukusanywa na kusafishwa. Zaidi ya hayo, uchafu unaweza kuondolewa zaidi kwa kutumia njia ya mto wa sucrose. Njia ya mto wa sucrose inaruhusu 60-70% ya bomba kujazwa na sampuli. Kwa hivyo, mbinu ya mto wa sucrose huwezesha kiasi kikubwa cha sampuli kuchakatwa.
Je, Kuna Ufanano Gani Kati ya Sucrose Gradient na Sucrose Cushion Ultracentrifugation?
- Sucrose gradient na sucrose cushion ultracentrifugation ni mbinu mbili zinazotumika kutenganisha mchanganyiko wa macromolecules.
- Katika mbinu zote mbili, kipenyo cha sucrose kinatumika.
- Centrifugation ni hatua katika mbinu zote mbili.
- Mashapo ya molekuli kama bendi au eneo katika kila mbinu.
Kuna tofauti gani kati ya Sucrose Gradient na Sucrose Cushion Ultracentrifugation?
Sucrose gradient ultracentrifugation ni mbinu inayotumia gradient inayoendelea ya sucrose kwenye mirija ya centrifuge huku sucrose cushion ultracentrifugation ni mbinu inayotumia discontinuous sucrose gradient. Kwa hivyo, hii ndiyo tofauti kuu kati ya gradient ya sucrose na sucrose cushion ultracentrifugation.
Aidha, sucrose cushion ultracentrifugation huruhusu ujazo mkubwa zaidi wa sampuli kuchakatwa wakati sucrose gradient ultracentrifugation inaruhusu ujazo wa chini kwa kulinganisha wa sampuli kuchakatwa.
Hapa chini ya maelezo ya jedwali huweka tofauti zaidi kati ya gradient sucrose na sucrose cushion ultracentrifugation.
Muhtasari – Sucrose Gradient vs Sucrose Cushion Ultracentrifugation
Sucrose gradient ultracentrifugation hutenganisha macromolecules kwa kutumia gradient ya sucrose inayoendelea. Kinyume chake, sucrose mto ultracentrifugation hutumia discontinuous sucrose gradient ili kutenganisha aina maalum ya chembe katika mchanganyiko. Kwa hivyo, hii ndio tofauti kuu kati ya gradient ya sucrose na sucrose cushion ultracentrifugation. Njia ya mto wa sucrose inaruhusu mkusanyiko wa chembe zisizobadilika za kimofolojia kwani haisababishi mkazo wa kimitambo, tofauti na ultracentrifugation ya gradient ya sucrose, ambayo huponda molekuli hadi chini ya bomba. Aidha, sucrose mto ultracentrifugation inaruhusu kiasi kikubwa cha sampuli kuchakatwa kuliko sucrose gradient ultracentrifugation.
