Tofauti Muhimu – Immunofluorescence vs Immunohistochemistry
Uchunguzi wa magonjwa, unaotumia mbinu za kibiolojia ya molekuli, umekuwa eneo ibuka la teknolojia ya kimatibabu ya maabara. Inajumuisha vipimo na mbinu zote za kutambua ugonjwa na kuelewa sababu ya ugonjwa kwa kuchanganua DNA, RNA au protini zilizoonyeshwa katika kiumbe. Maendeleo ya haraka katika uchunguzi wa molekuli yamewezesha utafiti wa kimsingi kuhusu magonjwa ya kuambukiza na yasiyo ya kuambukiza. Hizi hutumiwa kuamua mabadiliko katika mfuatano au viwango vya kujieleza katika jeni muhimu au protini zinazohusika na ugonjwa. Immunofluorescence (IF) na Immunohistochemistry (IHC) ni mbinu mbili kama hizo zinazotumiwa sana katika biolojia ya saratani. IF ni aina ya IHC ambapo mbinu ya utambuzi wa umeme hutumika kuchanganua kingamwili za monokloni na polyclonal, ilhali IHC hutumia mbinu za kemikali kugundua kingamwili za monokloni na polikloni. Hii ndiyo tofauti kuu kati ya IF na IHC.
Immunofluorescence (IF) ni nini?
Immunofluorescence ni mbinu ya kugundua ambapo kingamwili zinazotumiwa katika kipimo huwekwa lebo kwa kutumia rangi za fluorescent au protini za fluorescent kwa madhumuni ya kutambua. Kingamwili za upili zilizo na lebo zinaweza kusababisha ishara zisizohitajika za usuli; kwa hivyo, mbinu ya IF inategemea kuweka lebo ya kingamwili ya msingi yenyewe kwa sasa ili kuzuia ishara zisizohitajika wakati wa utambuzi. Kupitia mbinu hii, ufungaji usio maalum kati ya kingamwili ya msingi na ya upili huzuiwa, na ni haraka zaidi kwani hakuna hatua ya pili ya incubation inayohusika. Ubora wa data pia umeboreshwa.
Kielelezo 01: Madoa ya immunofluorescence mara mbili kwa BrdU, NeuN, na GFAP
Fluorochrome au rangi za fluorescent ni misombo inayoweza kufyonza mionzi, ikiwezekana mionzi ya urujuani mkali ambayo ina msisimko. Chembe hizo zinapofika ardhini kutoka katika hali ya msisimko, hutoa mionzi ambayo hunaswa na kugunduliwa na detector ili kuunda wigo. Ni muhimu sana kwamba lebo ya umeme ilingane na thabiti kwa mmenyuko fulani na inapaswa kuunganishwa vizuri kwa kingamwili ili kupata matokeo sahihi. Mojawapo ya fluorochromes zinazotumiwa zaidi ni fluorescein isothiocyanate (FITC), ambayo ni ya rangi ya kijani, na urefu wa kilele cha kunyonya na utoaji wa 490 nm na 520 nm, kwa mtiririko huo. Rhodamine, wakala mwingine anayetumiwa katika IF, ana rangi nyekundu na ina urefu tofauti wa unyonyaji na utoaji wa mawimbi ya 553 nm na 627 nm.
Immunohistochemistry (IHC) ni nini?
IHC ni mbinu ya kupima molekuli inayotekelezwa ili kutambua na kuthibitisha kuwepo kwa antijeni kwenye seli inayolengwa. Seli inayolengwa inaweza kuwa chembe ya kuambukiza, pathojeni ya vijidudu au seli mbaya ya tumor. IHC hutumia kingamwili za monoclonal na polyclonal kuamua uwepo wa antijeni zilizopo kwenye uso wa seli ya seli lengwa. Mbinu hiyo inategemea kumfunga antijeni-antibody. Alama ya utambuzi huunganishwa na kingamwili hizi ili kutambua kuwepo au kutokuwepo kwa antijeni fulani. Alama hizi zinaweza kuwa viashirio vya kemikali kama vile vimeng'enya, kingamwili zenye lebo ya umeme au kingamwili zilizo na lebo ya redio.
Kielelezo 02: Kipande cha ubongo wa panya kilichotiwa doa na Immunohistochemistry
Utumiaji maarufu wa IHC ni katika baiolojia ya seli za saratani ili kutambua uwepo wa uvimbe mbaya, lakini pia hutumika kugundua magonjwa ya kuambukiza.
Je, Kuna Ufanano Gani Kati ya Immunofluorescence na Immunohistochemistry?
- Immunofluorescence na Immunohistochemistry hufanyika chini ya hali ya in vitro.
- Mbinu zote mbili zinatokana na antijeni-antibody
- Zote mbili ni mbinu za haraka sana.
- Matokeo ya mbinu yanaweza kuzaliana tena.
- Wote wawili wameboresha ubora wa data.
- Mbinu hizi zinazotumika katika uchunguzi wa saratani na magonjwa ya kuambukiza.
Nini Tofauti Kati ya Immunofluorescence na Immunohistochemistry?
Immunofluorescence vs Immunohistochemistry |
|
| IF ni mbinu ya kugundua ambapo kingamwili zinazotumika katika kipimo huwekwa lebo kwa kutumia rangi za umeme au protini za florini ili kugunduliwa. | IHC ni mbinu ya kugundua ambapo kingamwili zinazotumika katika jaribio huwekwa lebo kwa kutumia kemikali au vipengele vya mionzi ili kugunduliwa. |
| Usahihi | |
| Usahihi ni wa juu zaidi katika mbinu ya IF ikilinganishwa na IHC. | Usahihi ni mdogo katika IHC. |
| Maalum | |
| IF ni mahususi zaidi. | IHC haina mahususi kidogo. |
Muhtasari – Immunofluorescence dhidi ya Immunohistochemistry
Taratibu za molekuli zimeleta mabadiliko mengi katika nyanja ya dawa, na hivyo kutoa mbinu za juu za kupima molekuli ambazo zimeleta mapinduzi katika uwanja wa uchunguzi. Uvumbuzi huu umesababisha utambuzi wa haraka na sahihi na uthibitisho wa ugonjwa huo, na hivyo kuwezesha utawala na uzalishaji wa madawa ya kulevya kwa mafanikio. Mbinu hizi pia hutumiwa katika pharmacology ili kupata malengo ya madawa ya kulevya na kuthibitisha mali ya pharmacokinetic ya madawa ya kulevya wakati wa kimetaboliki ya madawa ya kulevya. IF na IHC ni mbinu mbili za uchunguzi ambazo zinatokana na dhana ya kufunga antijeni na kingamwili, ingawa njia ya utambuzi katika mbinu zote mbili hutofautiana. IF hutumia kanuni ya fluorescence kugundua antijeni na IHC hutumia dhana ya muunganisho wa kemikali kugundua antijeni. Hii ndio tofauti kati ya IF na IHC.
Pakua Toleo la PDF la Immunofluorescence dhidi ya Immunohistochemistry
Unaweza kupakua toleo la PDF la makala haya na uitumie kwa madhumuni ya nje ya mtandao kulingana na dokezo la manukuu. Tafadhali pakua toleo la PDF hapa Tofauti Kati ya Immunofluorescence na Immunohistochemistry.
