PCR dhidi ya PCR ya Wakati Halisi
PCR au Polymerase chain reaction ni ugunduzi wenye mageuzi katika biolojia ya kisasa ya molekuli, ambao ulianzishwa kwa mara ya kwanza na mwanakemia Kary Mullis mwaka wa 1983. Huruhusu mfuatano mmoja katika DNA changamano kukuzwa kwa uchanganuzi. Wazo la msingi la PCR ni kwamba vianzio viwili, ambavyo vinasaidiana na nyuzi kinyume cha mlolongo wa DNA, vinaelekezwa kwa kila mmoja; primers hutoa nyuzi za ziada, kila moja ina primer nyingine. Kwa hivyo, matokeo yake ni idadi kubwa ya mlolongo unaolingana na DNA ambayo iko kati ya vianzio viwili. Kimeng'enya cha DNA polymerase hutumiwa kupanua vianzio katika PCR. DNA polymerase ni kimeng'enya kinachoweza joto, na ina uwezo wa kustahimili halijoto ya juu (94 hadi 95 °C) inayotumiwa kugeuza kiolezo cha DNA.
PCR inahusisha hatua tatu, ambazo ni, miduara inayorudiwa ya ubadilisho, uwekaji wa viasili, na usanisi wa DNA. Mashine ya kidhibiti joto hutumika kutekeleza majibu haya ili iweze kuratibiwa kubadilisha halijoto haraka na kwa usahihi. Maombi ya PCR ni uchunguzi wa jinai, alama za vidole za DNA, ugunduzi wa vimelea vya magonjwa, na uchanganuzi wa DNA ya spishi za awali za binadamu.
PCR ya Kawaida ni nini?
Kuna hatua kuu tatu za PCR ya kawaida, ambazo ni; Hatua ya ukuzaji wa DNA, mgawanyo wa PCR, na utambuzi wa bidhaa. Mgawanyiko wa sehemu za DNA kawaida hufanywa na electrophoresis ya gel ya agarose. Kisha bidhaa hizo hutiwa rangi ya bromidi ya etheiduim. Hatimaye, utambuzi hupatikana kwa taswira ya bendi kwenye jeli chini ya mwanga wa UV. Kwa hivyo, matokeo ya mwisho ya PCR ya kawaida hayaonyeshwa kama nambari. Kwa kawaida PCR ya kawaida inaweza kutambua kigezo kimoja pekee.
PCR ya wakati Halisi ni nini?
PCR ya wakati halisi inaweza kutambua ukuzaji wa bidhaa, bidhaa zinaposanisishwa. Pamoja na maendeleo ya teknolojia, PCR imekuwa mbinu maarufu sana, hasa kwa kutambua na kutambua bakteria katika vyakula. PCR ya wakati halisi hutumia mfumo wa rangi wa rangi na thermocycler iliyo na uwezo wa kutambua umeme.
Kuna tofauti gani kati ya PCR ya Kawaida na PCR ya Wakati Halisi?
• PCR ya Kawaida inachukua muda zaidi kwani hutumia gel electrophoresis kuchanganua bidhaa za PCR zilizokuzwa. Kinyume chake, PCR ya wakati halisi haichukui muda mwingi kwani inaweza kutambua vikuzaji katika awamu za awali za majibu.
• PCR ya wakati halisi hukusanya data katika awamu ya ukuaji wa haraka ya PCR huku PCR ya kawaida ikikusanya data katika Hatua ya Mwisho ya majibu.
• Matokeo ya mwisho ya PCR ya kawaida yanaweza yasiwe sahihi sana, lakini matokeo ya PCR ya wakati halisi ni sahihi sana.
• PCR ya wakati halisi ni nyeti zaidi kuliko PCR ya kawaida.
• PCR ya Kawaida ina azimio duni sana huku PCR ya wakati halisi inaweza kugundua mabadiliko madogo sana kutokana na ubora wa juu.
• Ugunduzi wa sehemu ya mwisho wa PCR ya kawaida una masafa mafupi yanayobadilika huku ugunduzi wa PCR wa wakati halisi una masafa mapana.
• Tofauti na PCR ya kawaida, mbinu za ugunduzi wa kiotomatiki hupatikana katika PCR ya wakati halisi.
• PCR ya Kawaida ni ya kisasa sana na inahitaji leba zaidi kuliko PCR ya wakati halisi.
• Tofauti na PCR ya wakati halisi, PCR ya kawaida haiwezi kubagua bakteria waliokufa na hai.
• PCR ya wakati halisi hutumia mfumo wa rangi ya fluorescent kutambua bidhaa wakati PCR ya kawaida hutumia bromidi ya ethidiamu na mwanga wa UV ili kuibua taswira ya bendi kwenye jeli ya agarose.
