Tofauti kuu kati ya Elisa na Elispot ni kwamba Elisa ni kipimo cha immunosorbent kilichounganishwa na kimeng'enya ambacho huamua jumla ya mkusanyiko wa protini zinazotoa ishara zilizofichwa, huku Elispot ni kipimo cha immunosorbent kilichounganishwa na kimeng'enya ambacho hutambua seli mahususi zinazotoa cytokine.
Elisa na Elispot ni vipimo viwili vya kimeng'enya vya immunosorbent vinavyotumika sana katika dawa, patholojia ya mimea, bioteknolojia na tasnia tofauti za dawa. Katika mbinu hizi, analyte ya protini hugunduliwa na antibody iliyoelekezwa dhidi yake. Elisa ni kipimo maarufu zaidi cha immunosorbent kilichounganishwa na enzyme kinachotumiwa katika maabara. Kwa upande mwingine, Elispot ni kipimo cha immunosorbent kilichounganishwa na kimeng'enya ambacho hakitumiwi badala ya Elisa bali hutumiwa pamoja na Elisa katika maabara.
Elisa Assay ni nini?
Elisa ni kipimo cha immunosorbent kilichounganishwa na kimeng'enya ambacho hubainisha jumla ya mkusanyiko wa protini zinazotoa ishara zilizofichwa. Ni uchanganuzi unaotumika sana wa uchambuzi wa biokemia ambao ulielezewa kwa mara ya kwanza na Engvall na Perlmann mwaka wa 1971. Mbinu hii hutumia aina ya awamu ya kinga ya kimeng'enya ili kugundua uwepo wa protini maalum katika sampuli ya kioevu kwa kutumia kingamwili zinazoelekezwa dhidi ya protini hii mahususi. Jaribio hili ni zana ya uchunguzi inayotumika sana katika dawa, ugonjwa wa mimea na teknolojia ya kibayoteknolojia.
Mechanism of ELISA Test
Katika sehemu kubwa ya jaribio la ELISA, kiasi kisichojulikana cha antijeni huwekwa kwenye kisanduku dhabiti (microlitre plate) mwanzoni. Kisha kingamwili ya msingi inayolingana inawekwa juu ya uso dhabiti wa usaidizi. Kingamwili hiki huunda changamano na antijeni (antijeni-antibody complex). Kingamwili ya msingi iliyofungwa na antijeni inaweza kugunduliwa na kingamwili ya pili ambayo imeunganishwa na kimeng'enya kupitia bioconjugation. Katika hatua ya mwisho ya mtihani wa Elisa, dutu iliyo na substrate ya enzyme huongezwa. Ikiwa kuna mshikamano unaofaa wa kingamwili ya msingi kwa antijeni, mabadiliko ya rangi yanayoweza kugunduliwa hutolewa na substrate. Hatimaye, hii hubainisha kiwango cha antijeni katika sampuli.
Kielelezo 01: Aina Tofauti za Elisa
Zaidi ya hayo, kuna mbinu tofauti kwa Elisa, kama vile Elisa wa moja kwa moja na Elisa asiye wa moja kwa moja. Hivi sasa, vipimo mbalimbali vya Elisa vinatumika kugundua vimelea vya magonjwa kwa binadamu kama vile Mycobacterium tuberculosis, rotavirus, virusi vya hepatitis B, virusi vya hepatitis C, enterotoxin inayozalisha E.coli, VVU, na SARS-CoV-2.
Elispot Assay ni nini?
Elispot ni kipimo cha immunosorbent kilichounganishwa na kimeng'enya ambacho hutambua seli mahususi zinazotoa cytokine. Cecil Czerkinsky alielezea ELISpot kwa mara ya kwanza mnamo 1983. Ni aina ya uchanganuzi unaozingatia upimaji wa kiasi cha mzunguko wa usiri wa saitokini kwa seli moja. Pia huainishwa kama mbinu inayotumia kingamwili kutambua uchanganuzi wa protini wa kibayolojia au kemikali. Kipimo cha Fluorospot ni tofauti ya kipimo cha Elispot, ambacho hutumia umeme ili kuchanganua uchanganuzi nyingi (protini za siri zaidi).
Mechanism of Elispot Test
Katika utaratibu huu, kingamwili mahususi ya sitokini ya monokloni huongezwa kwenye visima vya vibao vya microlitre mwanzoni. Kisha seli zinazohitajika zinazozingatiwa zinaongezwa kwenye visima. Baadaye, seli huingizwa. Wakati wa incubation ya seli, seli zinaruhusiwa kuguswa na uchochezi wowote na kutoa cytokine. Saitokini ambazo zimetolewa na seli zilizoamilishwa zitashikamana na kingamwili kwa kuwa seli zimezungukwa na kingamwili maalum za cytokine monokloni.
Kielelezo 02: Elispot Assay
Ili kugundua kingamwili hizi maalum za cytokine za monokloni, kingamwili mahususi za kugundua kibayotini huongezwa kwenye kisima. Kingamwili maalum za utambuzi wa biotini hukamata kingamwili mahususi za monokloni kwenye visima. Zaidi ya hayo, viunganishi vya streptavidin-enzyme huongezwa kwenye visima ili kushikamana na kingamwili. Katika hatua ya mwisho, substrates maalum huongezwa kwenye visima. Miitikio ya viunganishi vya kimeng'enya na viunga huzalisha madoa tofauti kwenye visima. Maeneo haya mahususi yanasomwa kwenye kisomaji kiotomatiki cha ELISpot. Hatimaye, hii itahesabu zaidi mzunguko wa utolewaji wa saitokini.
Je, Kuna Ufanano Gani Kati ya Elisa na Elispot?
- Zote ni vipimo vya immunosorbent vilivyounganishwa na vimeng'enya.
- Majaribio yote mawili hugundua uchanganuzi mahususi wa protini.
- Majaribio haya hutumia kingamwili mahususi kutambua vichanganuzi vya protini.
- Majaribio yote mawili hutumia vimeng'enya na substrates.
- Zinatumika kama zana ya uchunguzi katika maabara za matibabu.
Kuna tofauti gani kati ya Elisa na Elispot?
Elisa ni kipimo cha immunosorbent kilichounganishwa na kimeng'enya ambacho hubainisha jumla ya mkusanyiko wa protini zinazotoa ishara zilizofichwa. Kwa upande mwingine, Elispot ni kipimo cha immunosorbent kilichounganishwa na kimeng'enya ambacho hupima seli za kutoa sitokini. Kwa hivyo, hii ndio tofauti kuu kati ya Elisa na Elispot. Zaidi ya hayo, katika jaribio la Elisa, antijeni kwanza huwekwa kwenye visima vya microlitre. Kinyume chake, katika jaribio la Elispot, kingamwili kwanza haijasogezwa kwenye visima vya mikrolita. Hivyo, hii ni tofauti nyingine kati ya Elisa na Elispot.
Infographic hapa chini inawasilisha uchanganuzi wa kina wa tofauti kati ya Elisa na Elispot katika umbo la jedwali.
Muhtasari – Elisa vs Elispot
Elisa na Elispot ni vipimo viwili vya kimeng'enya vya immunosorbent vinavyotumika sana katika dawa, patholojia ya mimea, bioteknolojia na tasnia tofauti za dawa. Elisa hutambua kuwepo kwa ligand (protini) katika sampuli ya kioevu kwa kutumia kingamwili zinazoelekezwa dhidi ya ligand ili kupimwa. Uchunguzi wa Elispot ni njia inayotumika sana kwa ufuatiliaji wa majibu ya kinga. Inatambua seli za siri za cytokine kwa kutumia kingamwili. Ni mbinu ya immunoassay na bioassay. Kwa hivyo, huu ndio muhtasari wa tofauti kati ya Elisa na Elispot.
