Tofauti Muhimu – Mtiririko wa Cytometry dhidi ya FACS
Katika muktadha wa nadharia ya seli, seli ni kitengo cha kimsingi cha kimuundo na kiutendaji cha viumbe hai vyote. Upangaji wa seli ni mbinu ambayo hutumiwa kutenganisha seli tofauti kulingana na sifa za kisaikolojia na kimofolojia. Wanaweza kuwa na sifa za intracellular au extracellular. Mwingiliano wa DNA, RNA, na protini huzingatiwa kama sifa za mwingiliano wa ndani ya seli ilhali umbo, saizi na protini tofauti za uso huzingatiwa kama sifa za ziada. Katika sayansi ya kisasa, mbinu za kuchagua seli zimesababisha kusaidia uchunguzi tofauti katika masomo ya kibiolojia na pia katika uanzishwaji wa kanuni mpya kupitia utafiti wa dawa. Upangaji wa seli hufanywa kwa mbinu mbalimbali ambazo ni pamoja na za zamani zenye vifaa vichache na mbinu za kiteknolojia za hali ya juu kwa kutumia mashine za hali ya juu. Sitometry ya mtiririko, upangaji wa seli zilizoamilishwa za umeme (FACS), uteuzi wa seli sumaku na upangaji wa seli moja ndizo mbinu kuu zinazotumiwa. Saitometry ya mtiririko na FACS hutengenezwa ili kutofautisha seli kulingana na sifa zao za macho. FACS ni aina maalum ya saitoometri ya mtiririko. Saitoometri ya mtiririko ni mbinu ambayo hutumiwa wakati wa uchanganuzi wa idadi tofauti ya seli kulingana na molekuli tofauti za uso wa seli, saizi na ujazo ambayo inaruhusu uchunguzi wa seli moja. FACS ni mchakato ambao sampuli ya mchanganyiko wa seli hupangwa kulingana na sifa zao za mtawanyiko wa nuru na fluorescence katika vyombo viwili au zaidi. Hii ndiyo tofauti kuu kati ya saitoometri ya mtiririko na FACS.
Flow Cytometry ni nini?
Saitometi ya mtiririko ni mbinu ambayo hutumika kuchunguza na kubainisha usemi wa molekuli za ndani ya seli na uso wa seli na kufafanua na kubainisha aina mahususi za seli. Pia hutumika katika kubainisha kiasi cha seli na saizi ya seli na kutathmini usafi wa idadi ndogo ya watu ambayo imetengwa. Hii inaruhusu tathmini ya vigezo vingi vya seli moja kwa wakati mmoja. Flow cytometry hutumika katika kupima ukubwa wa fluorescence ambayo huzalishwa kutokana na kingamwili zenye lebo ya umeme ambayo husaidia kutambua protini au ligandi zinazofungamana na seli husika.
Kielelezo 01: Flow Cytometry
Kwa ujumla, saitoometri ya mtiririko inajumuisha mifumo midogo mitatu hasa. Wao ni fluidics, umeme, na optics. Katika saitoometri ya mtiririko, sehemu kuu tano zinapatikana ambazo hutumiwa katika upangaji wa seli. Wao ni, seli ya mtiririko (mkondo wa kioevu unaotumiwa kuwasafirisha na kuunganisha seli kwa mchakato wa kuhisi macho), mfumo wa kipimo (unaweza kuwa wa mifumo tofauti ikiwa ni pamoja na, taa za zebaki na xenon, nguvu ya juu ya kupozwa kwa maji au nguvu ya chini ya lasers hewa-kilichopozwa au diode lasers), ADC; Mfumo wa Kubadilisha Analogi hadi Dijiti, mfumo wa ukuzaji na kompyuta kwa uchambuzi. Upataji ni mchakato ambao data hukusanywa kutoka kwa sampuli kwa kutumia sitomita ya mtiririko. Utaratibu huu unapatanishwa na kompyuta ambayo imeunganishwa na cytometer ya mtiririko. Programu iliyopo kwenye kompyuta inachambua habari inayolishwa kwa kompyuta kutoka kwa cytometer ya mtiririko. Programu pia ina uwezo wa kurekebisha vigezo vya jaribio la kudhibiti saitomita ya mtiririko.
FACS ni nini?
Katika muktadha wa Flow cytometry, upangaji wa seli ulioamilishwa na Fluorescence (FACS) ni mbinu ambayo hutumika katika kutofautisha na kupanga sampuli ya mchanganyiko wa seli za kibiolojia. Seli zimetenganishwa na kontena mbili au zaidi. Njia ya kupanga inategemea vipengele vya kimwili vya seli ambayo ni pamoja na sifa za kutawanyika kwa mwanga na fluorescence ya seli. Hii ni mbinu muhimu ya kisayansi, ambayo inaweza kutumika kupata matokeo ya kuaminika ya upimaji na ubora wa ishara za fluorescence ambazo hutolewa kutoka kwa kila seli. Wakati wa FACS, awali, mchanganyiko uliopatikana wa seli; kusimamishwa kunaelekezwa katikati ya mkondo mwembamba wa kioevu ambao unapita kwa kasi. Mtiririko wa kioevu umeundwa ili kutenganisha seli katika kusimamishwa kulingana na kipenyo cha kila seli. Utaratibu wa mtetemo unatumika kwenye mkondo wa kusimamishwa ambao husababisha uundaji wa matone mahususi.
Kielelezo 02: FACS
Mfumo umesahihishwa ili kuunda tone moja lenye seli moja. Muda mfupi kabla ya kuunda matone, kusimamishwa kwa mtiririko husogea pamoja na kifaa cha kupimia cha fluorescence ambacho hugundua tabia ya fluorescence ya kila seli. Katika hatua ya kuundwa kwa matone, pete ya malipo ya umeme huwekwa ambayo malipo huingizwa kwenye pete kabla ya kipimo cha ukubwa wa fluorescence. Mara tu matone yanapoundwa kutoka kwa mkondo wa kusimamishwa, chaji hunaswa ndani ya matone ambayo kisha huingia kwenye mfumo wa kupotoka kwa tuli. Kulingana na malipo, mfumo huo unageuza matone kwenye vyombo tofauti. Mbinu ya kutumia malipo inatofautiana kulingana na mifumo tofauti inayotumika katika FACS. Kifaa kinachotumika katika FACS kinajulikana kama kipanga seli kilichoamilishwa cha fluorescence.
Je, Kuna Ufanano Gani Kati ya Flow Cytometry na FACS?
Saitoometri ya mtiririko na FACS hutengenezwa ili kutofautisha seli kulingana na sifa zao za macho
Kuna tofauti gani kati ya Flow Cytometry na FACS?
Flow Cytometry vs FACS |
|
| Saitometi ya mtiririko ni mbinu ambayo hutumika wakati wa uchanganuzi wa idadi tofauti ya seli kulingana na molekuli tofauti za uso wa seli, saizi na ujazo ambayo inaruhusu uchunguzi wa seli moja. | FACS ni mchakato ambao sampuli ya mchanganyiko wa seli hupangwa kulingana na sifa zao za mtawanyiko wa mwanga na fluorescence katika vyombo viwili au zaidi. |
Muhtasari – Flow Cytometry vs FACS
Seli ni kitengo cha kimsingi cha kimuundo na utendaji kazi cha viumbe hai vyote. Upangaji wa seli ni mchakato ambao seli hutenganishwa na kutofautishwa katika kategoria tofauti kulingana na sifa zao za ndani ya seli na nje ya seli. Saitoometri ya mtiririko na FACS ni mbinu mbili muhimu katika upangaji wa seli. Michakato yote miwili hutengenezwa ili kutofautisha seli kulingana na mali zao za macho. Saitoometri ya mtiririko ni mbinu ambayo hutumiwa wakati wa uchanganuzi wa idadi tofauti ya seli kulingana na molekuli tofauti za uso wa seli, saizi na ujazo ambayo inaruhusu uchunguzi wa seli moja. FACS ni mchakato ambao sampuli ya mchanganyiko wa seli hupangwa kulingana na sifa zao za mtawanyiko wa nuru na fluorescence katika vyombo viwili au zaidi. Hii ndio tofauti kati ya Flow Cytometry na FACS.
Pakua Toleo la PDF la Flow Cytometry dhidi ya FACS
Unaweza kupakua toleo la PDF la makala haya na uitumie kwa madhumuni ya nje ya mtandao kulingana na dokezo la manukuu. Tafadhali pakua toleo la PDF hapa Tofauti kati ya Flow Cytometry na FACS
